如何保存血液骨髓標本

1、血培養標本為什麼不能放冰箱保存

要放4度冰箱保存。不放的話血液中的物質會變性，裂解，導致標本以後就不能用了。尤其現在天氣比較熱，更不能在常溫下放的時間太長。

2、人的血液如何保存?

最早期的輸血，都是從供血者採取血液後即刻輸給患者，不存在保存問題。現在一般都是輸庫存血，即血液在血庫有一個短暫的保存期。為了輸入最有效的血液。也就是說要保存細胞的生存力，使其能在輸入後繼續生存，能完成其應有的作用，為此必須設法解決在保存中可能引起的細胞損傷的各種問題，例如盛血容器、抗凝劑、保存液等問題，其中以後兩者更為重要的。

（一）紅細胞的儲存損傷

把血液儲存在液體基質中時，紅細胞會發生一毓生物化學與結構上的改變，這些變化統稱這為紅細胞儲存損傷。這些損傷是影響輸血後紅細胞生存與功能改變的主要原因。儲存血液中發生了致死性傷害的紅細胞在輸入後很快被受體清除。通常衡量血液是否合格的標準是看血液輸入24小時，後其存活的紅細胞能否達到輸入量的70%，如能達到70%即為合格。

儲存損傷中重要變化之一就是紅細胞中ATP的消失。ATP降解成ADP又成AMP，AMP脫胺後變成IMP，並再降解，這樣下去核酸池可消耗殆盡。人紅細胞缺乏合成腺嘌呤可在有5-磷酸核糖-1-焦磷酸鹽存在時，在腺嘌呤磷酸核酸糖轉移酶的作用下又合成AMP，並生成ATP.這就癖發人們向儲存中加入腺嘌呤與磷酸，從而延長紅細胞的生存期。雖然上述看法由來已久，並在實際中加以應用，但近來民有報告認為ATP含量沒有直接關系，而是紅細胞其它變化縮短了其生存期。

在儲存早期，紅細胞可由盤形變成球形，繼之又可有膜脂質和蛋白的丟失，以及結構蛋白改變。最早期的形態與ATP的減少有關，並能因ATP含量的恢復而逆轉，但嚴重的變形就不可逆的，並與輸注後紅細胞生存能力的沽少有關。

還有一些非代謝性因素可以影響細胞膜的穩定性。現用的聚氯乙烯儲血袋中如含有DEPH成分，有利於防止細胞膜變形的作用，但其在血循環中的毒性作用尚有待研究。

（二）抗凝劑

1.枸櫞酸鹽：輸血工作中所用的最重在的抗凝劑是枸櫞酸鹽。枸櫞酸鹽與所采血液中鈣離子螯合，使其在凝血中反應中失去作用，在輸積壓後又被身體所代謝。枸櫞酸鹽是現在用的所有抗凝劑儲存的基本抗凝物質。最常用的是枸椽三鈉。除抗凝作用外，它還能阻止溶血的發生。

2.肝素：肝素可以用做抗凝液劑，但缺乏支持紅細胞代謝的能力。肝素中，紅細胞的ATP迅速消失，並伴有其它的儲存損傷信輸務血後生存能力下降，此外肝素的抗凝作用還可被肝素抑制因子及儲存血液細胞釋放中的凝血活酶類物質部分地中和。肝素抗漲血必須在采血後48小時內輸入，這過去用肝素抗凝血主要是為了避免由枸櫞酸抗凝血引起的低血鈣症，以及用於新生兒換血症。目前這些問題由於應用濃縮紅細胞而減少了。

（三）血液保存液

血液保存液除必須具備抗凝作用外，還應該有保護細胞生存的能力及功能的作用。針對這種要求，現在的保存液中主要成分有枸櫞酸鹽、葡萄糖、磷酸鹽和腺嘌呤。根據配方不同分為ACD與CPD兩大類，兩者判別是CPD中加有腺嘌呤及磷酸鹽，因此可延長紅細胞的保存期達到35天，並使紅細胞放氧功能增強。如只用枸櫞酸鹽，其有義氣期僅為5天，溶液中的葡萄糖是紅細胞代謝所必需的營養成分，可延長紅細胞保存時間，且防止溶血；並可使細胞中的有機磷消失緩慢，防止紅細胞儲存的損傷。

ACD液PH較低，對保存紅細胞不利，只能保存21天，且放氧能力迅速下降，這是其缺點。

由於成分輸血的發展，各種成分又有各自的適應條件，例如濃縮紅細胞可用晶體鹽保存液或膠體紅細胞保存液。還可以用低溫冷凍保存方法。而血小板的最適當保存溫度為22攝氏度（室溫）。

3、血液保存

你需要和醫生詢問一下，一般血液樣本應保存在2-8度，應該有專門的運輸箱，放入冰盒。但是檢測不同的項目，需要的儲存條件應該是不同的，這個你應該問問大夫，或者讓大夫與檢驗科的人員了解。

4、血樣的保存方法

常用EDTA的鈉鹽或鉀鹽作為抗凝劑，能與血液中的鈣離子結合成螯合物，而是鈣離子失去凝血作用，從而阻止血液凝固。

1、1%肝素溶液0.1ml於試管內，旋轉試管，使溶液均勻浸濕試管內壁，放入80～100℃烘箱烤乾，每管能使5～10ml血液不凝。急性血壓實驗時可在充滿生理鹽水的動脈套管內注入肝素20～25mg。體內抗凝：500～1000u/kg。

市售的肝素注射液每1ml含肝素12500u（相當於肝素鈉125mg，即1mg相當於100u）。應置冰箱內保存。

2、枸櫞酸鈉 3.8%的枸櫞酸鈉溶液1份可使9份血液不凝，用於紅細胞沉降速率的測定。因其抗凝血作用較弱而鹼性較強，不適用於供化驗用的血液樣品。做急性血壓實驗時則用5～7%的枸櫞酸鈉溶液。

3、草酸鉀 常用於供檢驗用血液樣品的抗凝。在試管內加飽和草酸鉀溶液2滴（或10%溶液0.2ml），輕輕敲擊試管，使溶液分散到管壁四周，置80℃以下的烘箱中烤乾（烘烤溫度過高，可使草酸鉀分解為碳酸鉀而失效），每管能使3～5ml血液不凝。供鉀、鈣含量測定的血樣不能用草酸鉀抗凝。

關於保存：
新鮮冰凍血漿在-20℃以下可保存1年

5、血液標本長期冷藏的處理流程是怎麼樣的

你好

6、血液如何保存

血液的保存是很嚴格的，不知你說的是哪種血液成份呢？一般的紅細胞類是2-8度，全血也是一樣。血小板是22-24度，血漿分新鮮的和冰凍的保存的時間與溫度都不一樣，血液的成份有很多，這只是其中的一種。保存期限也不同。

7、要做PCR的血液標本如何保存

最好是用淋巴細胞分離液把單個核細胞分離出來，然後-80℃保存。

外周血單個核細胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC）的分離是免疫學研究中的一項基本技術。目前國內外分離PBMC的常用方法是葡聚糖-泛影葡胺密度梯度離心法（ficoll-hypaque density gradient centrifugation），用此方法分離PBMC純度可達95％，淋巴細胞約佔90％，其中T淋巴細胞佔80％，B淋巴細胞佔4～10％。ficoll-hypaque混合溶液，又稱淋巴細胞分層液，在分離人PBMC時，要求其比重為1.077；分離小鼠單個核細胞時比重為1.080；分離大鼠單個核細胞時比重為1.084～1.087；分離馬單個核細胞時比重為1.090。

【原理】  

血液中各有形成分的比重存在差異，利用比重為1.077、近於等滲的ficoll-hypaque混合溶液（又稱淋巴細胞分層液）作密度梯度離心時，各種血液成分將按密度梯度重新聚集。血漿和血小板由於密度較低，故懸浮於分層液的上部；紅細胞與粒細胞由於密度較大，故沉於分層液的底部；PBMC密度稍低於分層液，故位於分層液界面上，這樣就可獲得PBMC。

    【器材與試劑】

    1.刻度離心管、吸管、試管、毛細吸管、橡皮乳頭、載玻片、蓋玻片、離心機等。

    2.pH7.2 Hanks液、肝素、生理鹽水溶液，淋巴細胞分層液。

    【方法】

1.靜脈取血2ml，加入含肝素溶液(10～50u／m1血樣本)的試管中，混勻，使血液抗

凝。用pH7.2 Hanks液將抗凝血稀釋1倍。

2.吸取2ml淋巴細胞分層液置於刻度離心管中，然後將離心管傾斜45O角，用毛細滴管將稀釋的全血沿管壁緩慢加至分離液上面，應注意保持兩者界面清晰。

3.在18℃～20℃下，用水平離心機以2000r/min離心20min。離心後細胞分布如圖。

 4.用毛細吸管輕輕插到混濁帶，沿管壁輕輕吸出此層細胞，移入另一支離心管中。即要吸取所有單個核細胞，又要避免吸取過多的分層液或血漿，以免混入其他細胞成分。

5.用Hanks液洗滌細胞3次。第一次2000r/min ，10 min；第2～3 次1500r/min ，10 min，可去掉大部分混雜的血小板。

6.將沉澱細胞懸於培養基中備用。

        【注意事項】

    1、實驗所用玻璃器皿應該潔凈。如果制備的單個核細胞懸液用於細胞培養時，上述操作過程都要在無菌條件下進行，所用器材、試劑都應為無菌。

    2、實驗中的細胞得率與室溫及分層液比重等有關。分層液應避光4℃保存。

3、往淋巴細胞分層液中加入稀釋全血時，不得將血液沖入分離液中，須保持兩層液體的清晰界面。

8、親子鑒定如何采血和數量及保存

用於親子鑒定的血痕樣本要求：5至6滴血保存在干凈的四層以上厚度的紗布上，載血的紗布用干凈的白紙包好即可，禁止用密封袋子捂住。一般注意供血人半年內沒有做過骨髓移植或輸血手術，如果有最好採集其他樣本。用專業的采血針或是縫衣服針采血都是一樣的，只是采血針直接采血就可以，縫衣服針建議用火烤一下，再用酒精消毒才采血。
原因-血液浸透四層紗布這個量夠做實驗。用紙質包血痕樣本會因透氣而利於更長時間的保存樣本好樣本。外源輸血和骨髓移植可能對受體存在外源dna信息的干擾。