骨髓片化學染色

1、瑞氏染色的步驟是什麼?

操作步驟：

1.滴加瑞氏吉姆薩A液(約0.5ml-0.8ml)塗片上，並讓染液覆蓋整個標本染色1min；

2. 再將瑞氏吉姆薩B液加於A液上面（滴加量為A液的2-3倍），以嘴或洗耳球吹出微風使液面產生漣漪狀，使兩液充分混合，染色3-10min。（染血片時間可略短，染骨髓片時間應視細胞量多少而異）

3.水洗（沖洗時不能先倒掉染液，應以流水沖去，以防有沉渣沉澱在標本上），乾燥、鏡檢。

注意事項：

1. 染色時間須視何種標本，塗片厚度，有核細胞多少，何種細胞及室溫等而定；通常染血液塗片時滴加B液後染2-4分鍾，染骨髓片則應不少於8分鍾；氣溫較低時，可適當延長染色時間。染色結果如出現嗜酸性粒細胞變鹼，則考慮是否染色時間太長所致。

2.做骨髓塗片時，因為骨髓纖維蛋白含量較高，凝固較快，所以塗片過程要快。骨髓不可用草酸鹽抗凝，否則會使血細胞核變形，核染色質緻密，胞漿空泡形成，出現草酸鹽結晶。

3.染液量需充足，勿使染液蒸發乾燥，以防染料沉著於塗片上。

4.做細胞染色時，當天氣寒冷或濕度較大時，應於37℃溫箱中保溫促干，以免細胞變形縮小或在染色時脫片。

5.染料放置時間越長，染色效果越好。

6. 本試劑應由專業人員使用。

拓展資料

Wrfeht和Giemsa都於1902年報告了各自的新的血液學染色劑，其主要特點是在制備多色性亞甲藍（主要指天青B）方面做了改進，使血細胞和瘧原蟲著色較好，操作簡便。

上述染色法均是含伊紅和亞甲基藍衍生物的復合染料。在臨床檢驗工作中，瑞氏染色法常用於血液、其他體液、分泌物和排泄物塗片中各種細胞的染色，有利於在顯微鏡下觀察細胞形態及對細胞進行分類檢查。

【染色原理】

瑞氏染色分兩相進行，第一相是酸性染料伊紅與細胞中的鹼性物質如血紅蛋白、嗜酸性顆粒等結合；鹼性染料天青B與細胞中的酸性物質如核染色質（chro－matin）、特異中性顆粒、血小板及富含核蛋白的胞質結合。第二相是天青B和伊紅在適宜條件下形成紫色的天青B一伊紅復合物（azure B－eosin complex），這種復合物是形成Romanowsky－Giemsa效應的基礎。

Romanowsky－Giemsa效應包括：①白細胞核染色質染成紫色，瘧原蟲的染色質染成紅色；②中性粒細胞的顆粒及血小板顆粒區染成紫色；③產生本效應必須有兩種染料參與，一種是天青B，另一種是伊紅。

Wittekind（1985）指出，天青B與DNA分子中的磷酸基結合，而伊紅既與DNA分子中的陽離子部位結合，又與天青B結合，與天青B的結合力來源於電子供一受體的電子轉移力，天青B的甲氨基（－NHCHs）與伊紅分子中的叛基（－COOH）間形成氫鍵。因此，天青B是噻嗪類染料中能與伊紅形成復合物的最佳選擇，因為擁有四個甲基側鏈的亞甲藍不能以氫鍵與伊紅結合。

甲醇除作為染料的溶劑，能將瑞氏染料解離成帶正電荷的天青B和帶負電荷伊紅外，因其具有脫水力，還可將細胞固定為一定形態，並使蛋白沉澱為顆粒狀、網狀結構，增加細胞與染料的接觸表面，增強染色效果。

細胞中的各種有機物質（特別是蛋白質）、染料等對環境的州值非常敏感。如環境偏酸，氫離子增多，降低對鹼性染料的親和力；增強伊紅著色，出現異常紅染；相反，則可出現異常藍染。最佳環境應維持在PH值6 4～6、8.因此，必須使用緩沖溶液。

參考資料：

網路_瑞氏染色

瑞氏染色原理及方法_醫學教育網

2、常規細胞化學染色陰性是什麼意思

常規細胞化學染色陰性是什麼意思
- 方法:骨髓塗片常規瑞氏染色,細胞化 學染色包括過氧化物酶(P0x)、特異性酯酶(...粒系的cE隨著粒細胞的成熟而增加,M.、M:的原粒一般為陰性

3、骨髓瘤細胞中用染色體製片，其中片的類型是什麼

染色與壓片
(1) 醋酸洋紅染色製片：取一處理好的根尖置於載玻片中間，用吸水紙吸去多餘的保存液，用刀片將根尖分生組織切 1 ：。將其切成薄片，加一小滴醋酸洋紅染色液．約 5 分鍾後加蓋玻片。用吸水紙放在蓋玻片上面，左手按住載玻片，用右手拇指在吸水紙上對准根尖部位施加壓力。或用鉛筆的橡皮頭輕敲蓋玻片即可，使材料均勻分散，細胞分離壓平。壓力要適當，注意不要移動蓋片。為增強染色效果，可將載玻片在酒精燈上稍加熱，但不使其沸騰。以免染料沉澱。加熱的作用不僅可以使材料軟化和易於著色．而且可以破壞部分細胞質，使核和染色體有一個比較清爽的背景。如果整個細胞染色較淺，可沿蓋片一側，滴加少許染色液，使其慢慢滲入．放置片刻再進行加熱，如此反復進行染色。
醋酸洋紅常用於染色體的臨時製片，其著色不強，分色效果也不甚佳，故不宜製作永久製片，
(2) 醋酸地衣紅染色製片：由於地衣紅很容易溶於酒精。所以材料從保存液中取出後，應當充分洗凈後浸入 45 ％醋酸中再進行染色。染色時，將材料置於小試管中，加入含鹽酸的 2 ％地衣紅使材料浸沒，在酒精燈上加熱 2 － 3 秒鍾．靜置約半小時或更長時間，取出材料置載玻片上，加一滴不含鹽酸的 l ％醋酸地衣紅染色液。如醋酸洋紅法操作進行壓片。地衣紅染色液染色，著色力比洋紅強，染色較深，尤其對根尖等體細胞染色體的染色比洋紅更顯優越。
(3) 鐵礬—蘇木精染色製片法：這是用在根尖細胞有絲分裂染色體計數中效果最好的一種方法，對各種植物的染色體均可染上較深的顏色，分色清晰，照像效果較好．利於標本長期保存。

4、骨髓細胞染色常用什麼方法，各是用於何種檢測。

骨髓細胞內外鐵染色,是進行貧血分類的常用組織化學染色方法,一般均採用普魯士蘭染色法,該法雖操作簡便,但若掌握不好,常使玻璃上沉積大量污染鐵,無法判定結果,我們曾查閱多種材料,對該項試驗的一些細節問題均無詳細介紹。最近我們參照各家材料,經過多次試驗從玻片處理試劑配製、試驗的時間、溫度、最後漂洗的手法復染時間的控制等步驟上,對細胞內外鐵染色的方法進行探討,摸索出了一套較滿意的染色方法,現介紹如下。

【作者單位】： 黑龍江省寶泉嶺農場醫院
【關鍵詞】： 骨髓細胞 鐵染色 染色方法 組織化學 試劑配製 玻片處理 氰化鉀 貧血分類 普魯士蘭 染色法
【分類號】：R361
【正文快照】：
骨髓細胞內外鐵染色,是進行貧血分類的常用組織化學染色方法。一般均採用普魯士蘭染色法,該法雖操作簡便,但若掌握不好,常使玻璃上沉積大量污染鐵,無法判定結果,我們曾查閱多種材料,對該項試驗的一些細節同題均無詳細介紹。最近我們參照各家材料,經過多次試驗從玻片處理試劑

5、骨髓細胞檢查報告中的化學染色中的POX陽性13%是指什麼?

POX是細胞的過氧化物酶染色,染色後,在顯微鏡下觀察,細胞中有藍黑色顆粒的為陽性,POX陽性13%就是指呈陽性的細胞占總細胞數的13%

6、急求骨髓塗片鐵染色法技術流程

1)4%的鹽酸溶液.:40ml(38%濃鹽酸)+340ml蒸餾水
2)40g/L亞鐵氰化鉀液
3)鹼性復紅:1g復紅+10ml無水乙醇+90ml(5%石碳酸溶液),用時取3ml加100ML水.
4)37%甲醛

7、骨髓片、血塗片主要依據瑞氏染色觀察細胞，為什麼還需要其他化學染色？比如鐵染色、過氧化物酶染色等。

骨髓片、血塗片主要依據瑞氏染色觀察細胞，為什麼還需要其他化學染色？比如鐵染色、過氧化物酶染色

8、骨髓塗片過氧化酶染色:未見原始細胞增加,內對照正常什麼意思

你的原始粒細胞高.說明核左移.有白血病的可能.你的中幼紅細胞.晚幼紅細胞都高.說明紅細胞增生.看了你的骨髓片報告;我估計你的血象顯示;白細胞是高的.血色素是低的.紅細胞也偏低. 粒細胞性白血病的可能性比較大. 鹼性磷酸酶異常.不排除骨病的可能。