骨髓來源的巨噬細胞的誘導步驟

1、gmcsf誘導巨噬細胞向m1型分化用什麼濃度

(1)巨核細胞是生成血小板的一種細胞。
巨核細胞雖然在骨髓的造血細胞中為數最少，僅占骨髓有核細胞總數的0.05%，但其產生的血小板卻對機體的止血功能極為重要。每個巨核細胞均可產生1000-6000個血小板。
生成血小板的巨核細胞也是從骨髓中的造血幹細胞分化發展來的。造血幹細胞首先分化生成巨核系祖細胞，也稱巨核系集落形成單位（colony forming unit-megakaryocyte,CFU-Meg）。祖細胞階段的細胞核內的染色體一般是2-3倍體。當祖細胞是2倍體或4倍體時，細胞具有增殖能力，因此這是巨核細胞系增加細胞數量的階段。當巨核系祖細胞進一步分化為8-32倍體的巨核細胞時，胞質開始分化，內膜系統逐漸完備。最後有一種膜性物質把巨核細胞的胞質分隔成許多小區。當每個小區被完全隔開時即成為血小板，一個個血小板通過靜脈竇竇壁內皮間的空隙從巨核細胞脫落，進入血流。
巨核細胞增殖、分化的調節機制類似於紅細胞系生成的調節，至少受兩種調節因子分別對兩個分化階段進行調節。這兩種調節因子是：巨核系集落刺激因子（Meg-CSF）和促血小板生成素（thrombopoietin,TPO）。
(2)巨噬細胞，一般為圓形或橢圓形，功能活躍時，可呈多突形。細胞核圓形或橢圓形，染色較深。細胞質較豐富，功能活躍時內含有許多顆粒或空泡。具有變形運動和吞噬能力。
組織細胞或巨噬細胞：有吞噬能力，細胞形狀不一，亦為多突起的星形細胞，注意與成纖維細胞的區別在於：細胞質中含有吞噬的台盼藍顆粒。細胞質染色較深，細胞輪廓較明顯。細胞核較小，圓形或卵圓形，染色較深，核內的結構看不清。
單核-巨噬細胞包括骨髓中的前單核細胞、外周血中的單核細胞、以及組織內的巨噬細胞(Mφ)。Mφ來源於血液中的單核細胞，而單核細胞又來源於骨髓中的前體細胞。單核-巨噬細胞是自體重要的免疫細胞，具有抗感染、抗腫瘤和免疫調節等重要作用。
(3)吞噬細胞：人類的吞噬細胞有大、小兩種。小吞噬細胞是外周血中的中性粒細胞。大吞噬細胞是血中的單核細胞和多種器官、組織中的巨噬細胞，兩者構成單核吞噬細胞系統。細菌被吞噬在吞噬細胞內形成吞噬體；溶酶體與吞噬體融合成吞噬溶酶體；溶酶體中多種殺菌物質和水解酶將細菌殺死並消化；菌體殘渣被排出細胞外。

2、巨噬細胞是如何參加細胞免疫的?

MPS細胞的功能

巨噬細胞吞噬作用

MPS細胞具有重要的生物學作用，不僅參與非特異性免疫防禦，而且是特異性免疫應答中一類關鍵的細胞，廣泛參與免疫應答、免疫效應與免疫調節。

（一）免疫防禦功能
病原微生物侵入機體後，在激發免疫應答以前即可被MPS細胞吞噬並清除，這是機體非特異免疫防禦機制的重要環節。

（二）免疫自穩功能
機體生長、代謝過程中不斷產生衰老與死亡的細胞以及某些衰變的物質，它們均可被單核吞噬細胞吞噬、消化和清除，從而維持內環境穩定。

（三）免疫監視功能
MPS細胞構成機體抗腫瘤免疫的重要一環。一般認為只有激活的巨噬細胞才能有效地發揮殺瘤效應，其機制可能是（1）吞噬腫瘤細胞；（2）藉助抗瘤抗體的ADCC作用殺傷瘤細胞；（3）產生TNF、IL-1等細胞因子，直接或間接地發揮殺瘤作用；（4）產生某些酶及活性氧分子直接殺傷或抑制腫瘤細胞生長。

（四）抗原呈遞功能
MPS細胞是最重要的一類抗原呈遞細胞。外來抗原經單核吞噬細胞處理後呈遞給T細胞，這是誘發免疫應答的先決條件。

（五）免疫調節功能
一方面抗原呈遞作用，誘導免疫應答，分泌具有免疫增強作用的各類生物活性物質，增強免疫應答。另一方面分泌多種抑制物抑制過度激活的巨噬細胞，調控MPS細胞功能。

（六）其他功能
MPS細胞還廣泛參與炎症、止血、組織修復、再生等過程。
相關內容的鏈接
造血幹細胞
淋巴細胞系（I） T細胞
淋巴細胞系（II） B細胞
淋巴細胞系（III）第三群淋巴細胞
單核吞噬細胞系統
其他抗原呈遞細胞
抗原呈遞細胞的抗原呈遞作用

3、單核細胞怎麼誘導培養成巨噬細胞

【培養原理】
1．培養用細胞因子：
nGM-CSF(粒細胞巨噬細胞集落刺激因子)：
GM-CSF是一種造血生長因子，在體外可刺激中性粒細胞和巨噬細胞的集落形成，並具有促進早期紅巨核細胞、嗜酸性祖細胞增殖和發育的功能。GM-CSF是最早被鑒定出來對於DC有作用的細胞因子之一。
GM-CSF在DC培養中的功能是促進單核細胞向大巨噬樣細胞分化，細胞表面MHC
II類分子的表達得以提高，從而增強細胞的抗原遞呈功能。此外，GM-CSF還可促進DC的存活。
nIL-4
(白細胞介素-4)
IL-4在由單核細胞誘導成DC的過程中發揮的作用是抑制巨噬細胞的過度生長，從而引導單核細胞向DC方向分化。若培養體系中不加IL-4，單核細胞將分化為巨噬細胞。同時，IL-4還有降低細胞表面表達CD14分子的能力。CD14表達水平的降低是單核細胞分化為DC的重要標志。
GM-CSF和IL-4共同作用可使單核細胞定向分化為未成熟DC(immature
DC)，此時的DC具有較強的抗原攝取和加工能力，但抗原遞呈能力很弱。細胞表面中度表達MHC
I類、II類分子和B7家族分子(CD80,
CD86等)，但不表達CD14。
nTNF-a
(腫瘤壞死因子-a)
TNF-a可下調未成熟DC的巨胞飲作用和表面Fc受體的表達，使細胞內MHC
II類分子區室(class
II
compartment)消失，但能夠上調細胞表面MHC
I類、II類分子和B7家族分子(CD80,
CD86等)的表達，使未成熟DC分化為成熟DC(mature
DC)，此時DC的抗原攝取和加工能力明顯減弱，而抗原遞呈能力顯著增強，可極強的激活T細胞。

4、什麼品牌轉染試劑可以轉染BMDM細胞（小鼠骨髓來源巨噬細胞）？轉染效率高啊？

BMDM小鼠骨髓來源巨噬原代細胞轉染siRNA或者質粒DNA的難度都是很大的，2020年1月西南醫科大學中西醫結合醫院使用美國Zeta Life公司Advanced Transfection Reagent轉染試劑，貨號AD600150，成功轉染BMDM細胞小鼠骨髓來源的巨噬細胞已發表文章，文章標題(A&P)compound
relievedcisplatin-

具體轉染條件等可以咨詢作者，希望對大家的細胞轉染帶來幫助。

5、小鼠骨髓誘導巨噬細胞求助

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6、請教外周血分單核細胞培養巨噬細胞的詳細步驟

【培養原理】
1．DC培養用細胞因子：
nGM-CSF(粒細胞巨噬細胞集落刺激因子)：
GM-CSF是一種造血生長因子，在體外可刺激中性粒細胞和巨噬細胞的集落形成，並具有促進早期紅巨核細胞、嗜酸性祖細胞增殖和發育的功能。GM-CSF是最早被鑒定出來對於DC有作用的細胞因子之一。

GM-CSF在DC培養中的功能是促進單核細胞向大巨噬樣細胞分化，細胞表面MHC II類分子的表達得以提高，從而增強細胞的抗原遞呈功能。此外，GM-CSF還可促進DC的存活。

nIL-4 (白細胞介素-4)
IL-4在由單核細胞誘導成DC的過程中發揮的作用是抑制巨噬細胞的過度生長，從而引導單核細胞向DC方向分化。若培養體系中不加IL-4，單核細胞將分化為巨噬細胞。同時，IL-4還有降低細胞表面表達CD14分子的能力。CD14表達水平的降低是單核細胞分化為DC的重要標志。

GM-CSF和IL-4共同作用可使單核細胞定向分化為未成熟DC(immature DC)，此時的DC具有較強的抗原攝取和加工能力，但抗原遞呈能力很弱。細胞表面中度表達MHC I類、II類分子和B7家族分子(CD80, CD86等)，但不表達CD14。
nTNF-a (腫瘤壞死因子-a)

TNF-a可下調未成熟DC的巨胞飲作用和表面Fc受體的表達，使細胞內MHC II類分子區室(class II compartment)消失，但能夠上調細胞表面MHC I類、II類分子和B7家族分子(CD80, CD86等)的表達，使未成熟DC分化為成熟DC(mature DC)，此時DC的抗原攝取和加工能力明顯減弱，而抗原遞呈能力顯著增強，可極強的激活T細胞。

7、骨髓巨噬細胞是半量換液還是全量換液

大鼠骨髓來源巨噬細胞原百代培養需要貼壁2個小時就換液
系統名稱應明確標明：酶的底物及所催化的反應性質.如果有兩個底物都應寫出,中間用冒號隔開.此外,底物的構型也應寫出.
如谷丙轉氨酶,其系統名稱為L-丙氨酸：α度-酮戊二酸氨基轉移酶；
再例如對催化下列反應酶的命名.?
ATP+D-葡萄糖→ADP+D-葡萄糖-6-磷酸
該酶的正式系統命名是：ATP：葡萄糖磷酸轉移酶,表示知該酶催化從ATP中轉移一個磷酸到葡萄糖分子上的道反應.它的分類數字是：E.C.2.7.1.1,E.C代表按國際酶學委員會規定的命名,第1個數字(2)代表酶的分類名稱(轉移酶類),第2個數字(7)代表亞類(磷酸轉移酶類),第3個數字(1)代表亞亞類(以羥基作專為受體的磷酸轉移酶類),第4個數字(1)代表該酶在亞-亞類中的排號(D葡萄糖作為磷酸基的受體).
如果其中一個底物是水,可以省去不寫,如D-葡萄糖-δ-內酯水解酶,不必寫成D-葡萄糖-δ-內酯：水屬水解酶.

8、大鼠骨髓來源巨噬細胞原代培養需要貼壁2個小時就換液嗎

大鼠骨髓來源巨噬細胞原代培養需要貼壁2個小時就換液
系統名稱應明確標明：酶的底物及所催化的反應性質.如果有兩個底物都應寫出,中間用冒號隔開.此外,底物的構型也應寫出.
如谷丙轉氨酶,其系統名稱為L-丙氨酸：α-酮戊二酸氨基轉移酶；
再例如對催化下列反應酶的命名.?
ATP+D-葡萄糖→ADP+D-葡萄糖-6-磷酸
該酶的正式系統命名是：ATP：葡萄糖磷酸轉移酶,表示該酶催化從ATP中轉移一個磷酸到葡萄糖分子上的反應.它的分類數字是：E.C.2.7.1.1,E.C代表按國際酶學委員會規定的命名,第1個數字(2)代表酶的分類名稱(轉移酶類),第2個數字(7)代表亞類(磷酸轉移酶類),第3個數字(1)代表亞亞類(以羥基作為受體的磷酸轉移酶類),第4個數字(1)代表該酶在亞-亞類中的排號(D葡萄糖作為磷酸基的受體).
如果其中一個底物是水,可以省去不寫,如D-葡萄糖-δ-內酯水解酶,不必寫成D-葡萄糖-δ-內酯：水水解酶.

9、哪個品牌轉染試劑可以轉染BMDMs細胞(小鼠骨髓來源的巨噬細胞）？

已經發表文章轉染BMDMs細胞(小鼠骨髓來源的巨噬細胞文章如下：

清華大學免疫學研究所發表文章

清華大學用invigentech產品

清華大學

清華大學免疫學研究所