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小鼠骨髓移植實驗步驟

發布時間:2021-02-25 10:31:18

1、猴頭菌營養粉有什麼作用

猴頭菇的 功效與作用
性平、味甘。利五臟,助消化;具有健胃,補虛,抗癌,益腎精之功效;主治食少便溏、胃及十二指腸潰瘍、神經衰弱、食道癌、胃癌、眩暈、陽痿等病症。年老體弱者食用猴頭菇,有滋補強身的作用。

2、格拉諾賽特的葯理毒理

1.葯理作用()本產品動員和增加正常或使用抗癌葯物的小鼠外周血的造血干祖細胞。(2)本產品在許多中性粒細胞減少症的動物模型中(比如腫瘤化療誘導的中性粒細胞減少症小鼠和骨髓移植小鼠等)可以觀察到中性粒細胞數的恢復加速。(3)在腫瘤化療誘發的中性粒細胞減少症的小鼠模型中,降低的抗感染能力可以恢復到正常水平,同時可以觀察到抗生素療效的增加。(4)在急性髓性白血病小鼠中,來格司亭能改善因腫瘤化療引起的中性粒細胞減少症,同時縮短中性粒細胞減少症的周期。(5)在體外應用人外周血單個核細胞進行的混合淋巴細胞反應實驗表明,來格司亭的作用並不幹擾器官移植中使用的免疫抑制葯物的作用。在體內的移植物抗宿主反應的實驗中也不會干擾上述葯物的作用。2.作用原理 (1)本制劑為一種結構與來源於人的粒細胞集落刺激因子(G-CSF)基本無差異的糖蛋白造血因子9.10),作用於骨髓中的粒細胞系祖細胞,促進其向中性粒細胞分化和增殖。(2)在有本制劑存在的條件下,用小鼠骨髓細胞培養,測定集落形成的結果表明,本制劑作用於粒細胞/巨嗜細胞系集落形成單位(CFU-GM),但對紅細胞(BFU-E、CFU-E)及巨核細胞系(CFU-Meg)的集落形成無促進作用(in vitro)12)。

3、用小鼠做造血幹細胞移植實驗時照射是為什麼

小鼠皮下或相關器臟可以給細胞提供存活的條件,也在一些情況下為幹細胞分化和分化後的成熟提供條件.同時為了使移植的細胞可以存活,免於免疫排斥,因此採用的小鼠一般都為免疫缺陷小鼠,也就是不會產生免疫反應.

4、做小鼠骨髓移植照光有什麼要注意的

balb/c小鼠照8個Gy應該沒有問題的,致死劑量是8.5
注意事項
1、小鼠是幾周的,受體鼠最好是8周齡以上的
2、雄的比較容易活下來
3、骨髓單個核輸注每隻尾靜脈1-2X10的7次方,你細胞是不是輸得太少了
4、另外照完得老鼠要按裸鼠那樣飼養,就是在SPF動物房養,用消過毒的籠子,食水都要消毒的
5、食用的水要用酸化水,PH值3-4的
6、如果小鼠照射完看著狀態不好,可以腹腔給一點沒有血清得培養基,如1640
7,想知道小鼠是不是造血衰竭死亡,你最好把剛剛死亡得小鼠骨髓切片,HE染色看一下,以前我碰見過小鼠別得細胞都恢復了,就是巨核恢復得慢,小鼠出血死掉。
8、當然放射源得數字不準,你可以摸一下照射得劑量梯度,如果照射的空白組死亡,而打同基因骨髓細胞的小鼠還活著,就是最佳的照射劑量了,

5、cyp1b1敲除是什麼動物模型

cyp1b1敲除是什麼動物模型
因此,本實驗結合前期實驗結果建立小鼠骨髓移植模型,探討異基因骨髓移植CYP1B1敲除對小鼠生存狀況的影響,旨在研究 CYP1B1基因敲除在小鼠骨髓移植

6、第一次籌建葯理實驗室方案(建立葯理實驗室怎樣准備)

一套完整的的動物解剖用手術器械。
2.幾十套大鼠、小鼠飼養籠、代謝籠、干濕溫度計、秒錶。
3.大小鼠、兔子灌胃器、研缽。
4.稱動物體重用的天平,稱動物臟器用的電子分析天平,扭力天平。
5.心電圖機。
6.電冰箱、恆溫干炒箱、離心機、顯微鏡、恆溫水浴鍋、高壓消毒鍋、超凈工作台、分光光度計等。
7.一般常用消耗品如量桶、燒杯、注射器等。
8、細胞培養箱
9、無菌操作台
10、-80℃冰箱供保存細菌用
11、做Aems試驗,還需要各種菌株,保存菌株、細胞用的液氮罐  
還有
小動物行為記錄分析系統
Hateeras無創血壓測量系統
大動物腦立體定位儀

 一。治療葯物監測(TDM)

臨床治療葯物監測的目的是通過測定血液中或其它體液中葯物的濃度並利用葯代動力學的原理使給葯方案個體化,以提高葯物的療效,避免或減少毒副反應,其中對於化療葯物及免疫抑制劑的使用,治療葯物監測顯得尤為重要。現國內大多採用免疫法進行檢測,該法對試劑的依賴程度高,試劑盒昂貴,檢測葯物種類有限,尤其不能區分原型葯及代謝葯,特異性及結果准確性較差。

為提高檢測靈敏度及結果的准確性,為臨床個體化用葯提供更可靠的依據,我們採用高效液相色譜-質譜法(LC-MS/MS)進行血液中目標葯物濃度的監測,採用先進的AB Sciex 4000QTRAP質譜儀進行檢測。與傳統的光譜法、免疫法相比,高效液相色譜-質譜法(LC-MS/MS)靈敏度及專屬性高、重現性好,用目標離子特徵性碎片定量,特異性強,干擾降低,更能准確反映目標葯物的血葯濃度,為臨床應用治療窗窄、毒副作用大、個體代謝差異大的葯物提供了可靠的依據,減少因葯物過量造成的毒副作用以及葯量過低導致的療效不佳,指導臨床個體化用葯。

二。 CYP450葯物代謝酶基因多態性檢測

為輔助個體化用葯,我們現開展「CYP2C9*3、CYP2C19*2基因型DNA序列測定分析」項目,採用基於測序方法分析患者是否為純合型、雜合型CYP2C9*3或CYP2C19*2基因型。細胞色素氧化酶P450(CYP450)是人類肝臟中一種重要葯物代謝酶系統,能代謝多種內源性底物、葯物和外源性化合物,主要包括三種超家族:CYP1、CYP2和CYP3。

CYP2C9是CYP2C亞家族中的一種同功酶,大約10%的臨床常用葯經由CYP2C9氧化代謝,包括甲苯磺丁脲、S-華法林、苯妥因、格列甲嗪、格列本脲、托拉噻咪、絡沙坦、厄貝沙坦和許多非甾體類抗炎葯物(如布洛芬、氯諾昔康、雙氯芬酸和萘普生等葯物)。迄今已發現CYP2C9存在30 種等位基因,CYP2C9*1 為具有強代謝活性的野生型基因,CYP2C9*3是中國人中最常見的弱代謝基因型,CYP2C9*3能顯著地損害CYP2C9的催化功能,但對不同的底物葯物催化代謝的影響不同,具有顯著底物依賴性。弱代謝型CYP2C9導致酶活性降低,其葯物代謝能力呈「正常基因純合子 >; 正常基因與弱代謝基因雜合子>;弱代謝基因純合子或雜合子」的趨勢。

在血液病化療和骨髓移植中,常用的抗癌葯物如環磷醯胺、異環磷醯胺、依託泊苷等的代謝速度和CYP2C9的基因型相關。CYP2C9的基因型及共同服用的調節CYP2C9活性的葯物均會影響這些葯物的代謝速度。

CYP2C19是CYP2C亞家族中的一種同功酶,它參與多種葯物的代謝,包括質子泵抑制劑、三環類抗抑鬱葯、抗癲癇葯、抗精神病葯、降糖葯、抗凝葯、抗瘧疾葯以及一些抗癌葯物,如美芬妥英、安定、苯巴比妥、普耐洛爾、奧美拉唑、氯胍以及蘭索拉唑、泮妥拉唑等。CYP2C19至少存在18種等位基因,CYP2C19*1 為具有強代謝活性的野生型,而其餘基因型均導致代謝活性降低。CYP2C19*2在中國人群中的頻率較高,與葯物代謝關系最為密切,其它等位基因發生的頻率很少。CYP2C19葯物代謝能力呈現為「強代謝型基因純合子 >; 強代謝型與弱代謝型基因雜合子 >; 弱代謝型基因純合子或雜合子」的變化趨勢。

在血液病化療和骨髓移植中,常用的抗真菌葯伏利康唑的代謝酶主要是CYP2C19,次要代謝酶為 CYP2C9和CYP3A4。15-20%的亞洲人群是CYP2C19弱代謝型,其中主要為CYP2C19*2基因型。CYP2C19的基因型及共同服用的調節CYP2C19活性的葯物均會影響伏立康唑的血葯濃度。

AB Sciex 4000QTrap質譜儀簡介

AB Sciex 4000QTRAP四級桿-線性離子肼復合型質譜儀能在同一質譜上同時提供超高靈敏度的定量分析和定性分析功能,串聯四級桿的掃描方式和線性離子肼的掃描方式相結合,使其在葯物發現、毒理研究、代謝組學、法醫學、臨床研究等諸多領域發揮重要作用,它是超低含量組分的快速、自動化定量定性分析的最理想工具。它具有諸多優點:

1。串聯四極桿和線性離子阱技術相結合,同一台質譜能同時提供超高靈敏度的定量和定性分析功能;

2。 m/z范圍:5~2800 amu(四極桿模式);50~2800 amu(線性阱模式);

3。具有串聯四極桿的母離子掃描、中性丟失掃描、MRM等獨有的功能,從而保證了高靈敏度和特異性;

4。高靈敏度的全掃描MS、CID-MS/MS、多級質譜掃描(MS3)、增強多電荷掃描功能(EMC)、時間延遲碎裂功能(TDF)掃描功能,增強了定性分析能力;

5。線性離子阱技術具有更大的離子容納能力和空間,因此克服了傳統離子阱由於阱的體積小而帶來的「空間電荷效應影響,離子容量和捕獲效率比傳統離子阱高;

6。 TurboV離子源,靈敏度高,適應流速范圍寬,方便易用;

7。 Q2 LINAC高壓碰撞室技術提高離子從介面到檢測器的傳輸效率,有效消除記憶效應,降低MRM每個離子對的駐留時間,重現性好,適合於高通量、多組分分析。

 

7、關於小鼠骨髓瘤細胞

骨髓瘤細胞不是病毒。
骨髓瘤細胞是一種癌細胞,他對小鼠造成傷害就是通過不斷增殖造成的。所以最後小鼠會腹水,這時候可以從腹水中提取單克隆抗體。小鼠最終會因為骨髓瘤細胞過度繁殖死亡。就和患癌症一樣,但是小鼠在實驗室中有很多,所以實驗室還用這個辦法制備單克隆抗體。

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