小鼠骨髓巨噬細胞分化

1、巨噬細胞的吞噬作用 巨噬細胞是怎樣培養的

巨噬細胞（英語：Macrophages）是一種位於組織內的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源於骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內參與非特異性防衛（先天性免疫）和特異性防衛（細胞免疫）。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用（即吞噬以及消化），並激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應。

巨噬細胞也建有無限細胞系，大多來自小鼠，如P338D1、S774A.1、RAW309Cr.l等，均獲惡性，培養中呈巨噬細胞形態和吞噬功能，易於傳代和瓶壁分離，但難以建株。培養巨噬細胞可用各樣方法和各種來源來獲取細胞，以小鼠腹腔取材法最為實用，其法如下：

1、實驗前三天，向每隻小鼠腹腔內注入無菌硫羥乙酸肉湯1ml（勿注入腸內）。

2、引頸殺死動物，手提鼠尾將全鼠浸入70%酒精中3～5秒。

3、置動物於解剖台上，用針頭固定四肢，雙手持鑷撕開皮膚拉向兩側，暴露出腹膜，但勿傷及腹膜壁。

4、再用70%酒精擦洗腹膜壁後，用注射器吸10mlEagle液注入腹腔中，同時從兩側用手指揉壓腹膜壁，令液體在腹腔內充分流動。

5、用針頭輕輕挑起腹壁，使動物體微傾向一側，使腹腔中液體集於針頭下吸取入針管內。

6、小心拔出針頭，把液體注入離心管中，250g4℃離心10分鍾，去上清，加10mlEagle培養基。

7、計數細胞，每隻小鼠可產生20～30×105細胞，其中90%為巨噬細胞。

8、為獲取3×105帖附細胞/平方厘米，需接種2.5×106/ml。

9、為純化培養細胞，去除其它白細胞，接種數小時後，去除培養液，用Eagle液沖洗1～2次後，再加新Eagle培養液置37℃，5%CO2溫箱中培養。

2、為什麼小鼠的巨噬細胞不吞噬自身的正常細胞

因為巨噬細胞能對所接觸的細胞進行特異性識別，通過識別其表面的糖蛋白來判斷是否需要進行吞噬。為了成功進行區分，免疫系統會利用每一個細胞表面的特殊分子模式來進行判斷該細胞是敵是友。幾乎所有的細胞表面都有MHC-I,CD8+T細胞能識別細胞表面的MHCI+抗原復合物，識別後進行攻擊。
細胞免疫的產生分為感應、反應和效應三個階段。其作用機制包括兩個方面：⑴致敏T細胞的直接殺傷作用。當致敏T細胞與帶有相應抗原的靶細胞再次接觸時，兩者發生特異性結合，產生刺激作用，使靶細胞膜通透性發生改變，引起靶細胞內滲透壓改變，靶細胞腫脹、溶解以致死亡。致敏T細胞在殺傷靶細胞過程中，本身未受傷害，可重新攻擊其他靶細胞。參與這種作用的致敏T細胞，稱為殺傷T細胞。⑵通過淋巴因子相互配合、協同殺傷靶細胞。如皮膚反應因子可使血管通透性增高，使吞噬細胞易於從血管內游出；巨噬細胞趨化因子可招引相應的免疫細胞向抗原所在部位集中，以利於對抗原進行吞噬、殺傷、清除等。由於各種淋巴因子的協同作用，擴大了免疫效果，達到清除抗原異物的目的。
巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞（英語：Macrophages）是一種位於組織內的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源於骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內參與非特異性防衛（先天性免疫）和特異性防衛（細胞免疫）。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用（即吞噬以及消化），並激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應。

3、什麼品牌轉染試劑可以轉染BMDM細胞（小鼠骨髓來源巨噬細胞）？轉染效率高啊？

BMDM小鼠骨髓來源巨噬原代細胞轉染siRNA或者質粒DNA的難度都是很大的，2020年1月西南醫科大學中西醫結合醫院使用美國Zeta Life公司Advanced Transfection Reagent轉染試劑，貨號AD600150，成功轉染BMDM細胞小鼠骨髓來源的巨噬細胞已發表文章，文章標題(A&P)compound
relievedcisplatin-

具體轉染條件等可以咨詢作者，希望對大家的細胞轉染帶來幫助。

4、觀察到小鼠體內吞噬細胞如何用免疫學理論進行解釋

吞噬細胞有大、小兩種。小吞噬細胞是外周血中的中性粒細胞。大吞噬細胞是血中的單核細胞內和多種器官、容組織中的巨噬細胞，兩者構成單核吞噬細胞系統。
中性粒細胞占血液白細胞總數的60%一70%，是白細胞中數量最多的一種。中性粒細胞來源於骨髓，產生速率高，每分鍾約為107個，但存活期短，約為2—3天。
單核細胞由骨髓中的單核細胞前體發育分化而成，約占血液中白細胞總數的3%一8%。其體積較淋巴細胞略大。單核細胞在血液中僅停留12—24小時，然後進入結締組織成器官，發育成熟為巨噬細胞。定居巨噬細胞有不同的名稱。在肝中為枯否細胞、在腦中為小膠質細胞、在骨中為破骨細胞等。遊走巨噬細胞大於單核細胞數倍，壽命較長，可在組織中存活幾個月。
人體內專職吞噬細胞分為兩類：一類是小吞噬細胞，主要是中性粒細胞，還有嗜酸性粒細胞；另一類是大吞噬細胞即單核吞噬細胞系統，包括末梢血液中的單核細胞和淋巴結、脾、肝、肺以及漿膜腔內的巨噬細胞、神經系統內的小膠質細胞等。

5、哪個品牌轉染試劑可以轉染BMDMs細胞(小鼠骨髓來源的巨噬細胞）？

已經發表文章轉染BMDMs細胞(小鼠骨髓來源的巨噬細胞文章如下：

清華大學免疫學研究所發表文章

清華大學用invigentech產品

清華大學

清華大學免疫學研究所

6、小鼠腹腔巨噬細胞分離用什麼肉湯

小鼠腹腔巨噬細胞分離用什麼肉湯
又稱抗體依賴淋巴細胞，直接從骨髓的多能幹細胞衍化而來，表面無抗原標志，但有抗體IgG的受體。發揮殺傷靶細胞的功能時必須有靶細胞的相應抗體存在。靶細胞表面抗原與相應抗體結合後，再結合到K細胞的相應受體上，從而觸發K細胞的殺傷作用。凡結合有IgG抗體的靶細胞，均有被K細胞殺傷的可能性。因此，也可以說K細胞本身的殺傷作用是非特異性的，其對靶細胞的識別完全依賴於特異性抗體的識別作用。K細胞約占人外周血中淋巴細胞總數的5～10％，但殺傷效應卻很高。當體內僅有微量特異性抗體，雖可與抗原結合，但不足以激活補體系統破壞靶細胞時，K細胞即可發揮其殺傷作用。K細胞在腹腔滲出液、脾臟中較多，淋巴結中較少，胸導管淋巴液中沒有，表明K細胞不參加淋巴細胞的再循環。但K細胞的殺傷作用在腫瘤免疫、抗病毒免疫、抗寄生蟲免疫、移植排斥反應及一些自身免疫性疾病中均有重要作用，產生的免疫應答有免疫防護及免疫病理兩種類型。如靶細胞過大（寄生蟲或實體瘤），吞噬細胞不能發揮作用或靶細胞表面被抗體覆蓋，T細胞不能接近時，K細胞仍能發揮作用。腎移植中的排斥反應，機體自身免疫性疾病的受累器官或組織的破壞，都可能與K細胞有關。

7、小鼠骨髓誘導巨噬細胞求助

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