1、小鼠骨髓細胞染色實驗中有哪些材料可用作制備染色標本,其基本特性是什麼
在明視野下，若能看清的話就不要染色了。因為在無法觀測清楚時，才會染色。通常染色劑會影響微生物的活性，更多的是使細胞死亡。即使是活性染料也有一定的影響。 根據經驗 不染色完全可以看見顯微結構 細胞膜 細胞壁 液泡 核 基本可以看見 葉綠體隱約可以看見 當然解析度和光圈大小需要調整到最佳狀態 鞭毛可以隱約看見 黴菌放線菌細菌的形態當然是不染色完全可以看 如果想看更細致些 比如線粒體 高爾基體 核膜 微囊體 膜泡等亞顯微結構 需要用特定的分子染料進行染色再進行觀察 如果你不需要做活體實驗而只是觀察的話，染色吧，清晰度好一些。
2、為何基因敲除需要用到嵌合體小鼠
嵌合體是指動物的兩顆受精卵融合在一起成為一個個體並成長。遺傳學上用以指不同遺傳性狀嵌合或混雜表現的個體，亦指染色體異常類型之一。轉基因小鼠制備過程中必須要經歷的一個過程，所以基因敲除小鼠必須要用到嵌合體小鼠。
3、如何取小鼠骨髓細胞
1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後，拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨，用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚，用眼科剪小心剪開皮膚，並分離兩下肢的皮膚，往下在腳踝處剪斷，往上在髖關節處剪斷，這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉，分別剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（脛骨）,剪去兩端軟骨，露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔，沖洗骨髓腔以獲得骨髓，一般用2-3ml培養基沖洗兩次，可沖出絕大部分細胞。
5、過濾：用2OO目的濾網過濾，將濾網的中央插入到離心管裡面25px處，然後用注射器吸取骨髓液，慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中，去除殘渣。
6、離心：將離心管放置離心機中離心10分鍾（1350r/min）
7、去上清，加入1ml紅細胞裂解液ACK，靜置3分鍾，再加9ml HBSS溶液，進行離心10分鍾，棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次，室溫，1350r/min離心10分鍾。計數活細胞，用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基，然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇，
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻，24孔板鋪板培養，每個孔1ml.
4、如何提取小鼠骨髓細胞?
1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後，拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨，用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚，用眼科剪小心剪開皮膚，並分離兩下肢的皮膚，往下在腳踝處剪斷，往上在髖關節處剪斷，這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉，分別剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（脛骨）,剪去兩端軟骨，露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔，沖洗骨髓腔以獲得骨髓，一般用2-3ml培養基沖洗兩次，可沖出絕大部分細胞。
5、過濾：用2OO目的濾網過濾，將濾網的中央插入到離心管裡面25px處，然後用注射器吸取骨髓液，慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中，去除殘渣。
6、離心：將離心管放置離心機中離心10分鍾（1350r/min）
7、去上清，加入1ml紅細胞裂解液ACK，靜置3分鍾，再加9ml HBSS溶液，進行離心10分鍾，棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次，室溫，1350r/min離心10分鍾。計數活細胞，用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基，然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇，
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻，24孔板鋪板培養，每個孔1ml.
5、做小鼠骨髓移植照光有什麼要注意的
balb/c小鼠照8個Gy應該沒有問題的，致死劑量是8.5
注意事項
1、小鼠是幾周的，受體鼠最好是8周齡以上的
2、雄的比較容易活下來
3、骨髓單個核輸注每隻尾靜脈1－2X10的7次方，你細胞是不是輸得太少了
4、另外照完得老鼠要按裸鼠那樣飼養，就是在SPF動物房養，用消過毒的籠子，食水都要消毒的
5、食用的水要用酸化水，PH值3－4的
6、如果小鼠照射完看著狀態不好，可以腹腔給一點沒有血清得培養基，如1640
7，想知道小鼠是不是造血衰竭死亡，你最好把剛剛死亡得小鼠骨髓切片，HE染色看一下，以前我碰見過小鼠別得細胞都恢復了，就是巨核恢復得慢，小鼠出血死掉。
8、當然放射源得數字不準，你可以摸一下照射得劑量梯度，如果照射的空白組死亡，而打同基因骨髓細胞的小鼠還活著，就是最佳的照射劑量了，
6、小鼠骨髓瘤細胞 是什麼
骨髓瘤細胞是一種癌細胞，他對小鼠造成傷害就是通過不斷增殖造成的。所以最後小鼠會腹水，這時候可以從腹水中提取單克隆抗體。小鼠最終會因為骨髓瘤細胞過度繁殖死亡。就和患癌症一樣，但是小鼠在實驗室中有很多，所以實驗室還用這個辦法制備單克隆抗體。