骨髓提取

1、請問如何提取造血幹細胞？

造血幹細胞存在於骨頭里，傳統方式是用骨腔穿刺採集，現在則多通過注射動員劑，把骨腔里的造血幹細胞釋放出來進入血管，通過機器把造血幹細胞從血液中分離出來。
在手術前，一般不採取先採集造血幹細胞，因為操作復雜、費用更高。如果先採集，長期保存等待手術，就要把細胞放在液氮裡面，由常溫37攝氏度變為零下196攝氏度，使用時再恢復到常溫。在這個過程中，細胞很容易失活，影響療效。

幹細胞是一種嗜鹼性獨核細胞，其大小約為8μm，呈圓形，胞核為圓形或腎形，胞核較大，具有2個核仁，染色質細質而分散，胞漿呈淺藍色不帶顆粒，在形態上與小淋巴細胞極其相似，但淋巴細胞體積較小，染色質濃染，核仁不明顯且有細胞器。
造血幹細胞（ Stem cell ，SC）是指骨髓中的幹細胞，它具有自我更新能力並能分化為各種血細胞前體細胞，最終生成各種血細胞成分，包括紅細胞、白細胞和血小板，它們也可以分化成各種其他細胞。造血幹細胞包括三級分化水平，即多能幹細胞（pleuripotent　stemcell），定向幹細胞（Committedstem　cell）及成熟的子代細胞。造血幹細胞的兩個重要特徵是，可分化成所有類型的血細胞和高度的自我更新或自我復制能力。
造血幹細胞的移植是治療血液系統疾病、先天性遺傳疾病以及多發性轉移性腫瘤疾病的最有效方法。與骨髓移植和外周血幹細胞移植相比，造血幹細胞移植的長處在於無來源的限制，對HLA配型要求不高，不易受病毒或腫瘤的污染。並且捐獻造血幹細胞對捐獻者的身體並無很大傷害。

2、牛骨髓是怎麼提取出來的

1、牛骨髓提取方法：
選完整的脊椎骨,在醋里輕浸以下10分鍾左右,在清水中洗凈,切成你想要的幾段長,再沸水中輕煮以下,就能順利取出骨髓,再切除兩端.就是你想要的。
2、牛骨髓，葯劑，為牛科動物黃牛或水牛的骨髓。高蛋白、低脂肪及含優質有機鈣的富營養原料，很多壯骨粉、補鈣產品所用原料就是來自牛骨髓。

3、如何提取造血幹細胞？

傳統方式是:

用骨腔穿刺採集，現在則多通過注射動員劑，把骨腔里的造血幹細胞釋放出來進入血管，通過機器把造血幹細胞從血液中分離出來。

4、如何提取小鼠骨髓細胞?

1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後，拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨，用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚，用眼科剪小心剪開皮膚，並分離兩下肢的皮膚，往下在腳踝處剪斷，往上在髖關節處剪斷，這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉，分別剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（脛骨）,剪去兩端軟骨，露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔，沖洗骨髓腔以獲得骨髓，一般用2-3ml培養基沖洗兩次，可沖出絕大部分細胞。
5、過濾：用2OO目的濾網過濾，將濾網的中央插入到離心管裡面25px處，然後用注射器吸取骨髓液，慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中，去除殘渣。
6、離心：將離心管放置離心機中離心10分鍾（1350r/min）
7、去上清，加入1ml紅細胞裂解液ACK，靜置3分鍾，再加9ml HBSS溶液，進行離心10分鍾，棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次，室溫，1350r/min離心10分鍾。計數活細胞，用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基，然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇，
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻，24孔板鋪板培養，每個孔1ml.

5、骨髓是從血液里提取的,還是從骨骼里提取的?

骨髓是人體的造血組織，位於身體的許多骨骼內。

成年人的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能製造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能製造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。黃骨髓主要是脂肪組織，當人體貧血時，它可以轉化為紅骨髓。有些葯物如氯黴素及呋喃類,在長期大量使用後,可影響骨髓造血功能,引起再生障礙性貧血.

充填在骨髓腔和骨松質的間隙內，分為紅骨髓和黃骨髓兩類，紅骨髓內涵不同發育階段的紅細胞和某些白細胞及脂肪組織。

骨髓

①藏於骨腔中的髓質。《素問·平人氣象論》：「臟真下於腎，腎藏骨髓之氣也。」
②指病在骨髓，喻疾病部位較深。《靈樞·寒熱病》：「絡脈治皮膚，……經脈治骨髓、五臟。」

什麼是骨髓

骨髓是存在於長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔，扁平骨（如髂骨、肋骨）和不規則骨（胸骨、脊椎骨等）的松質骨間網眼中的一種海綿狀的組織，能產生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。成人的一些骨髓腔中的骨髓含有很多脂肪細胞，呈黃色，且不能產生血細胞，稱為黃骨髓。人出生時，全身骨髓腔內充滿紅骨髓，隨著年齡增長，骨髓中脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，最後幾乎只有扁平骨松質骨中有紅骨髓。此種變化可能是由於成人不需全部骨髓腔造血，部分骨髓腔造血已足夠補充所需血細胞。當機體嚴重缺血時，部分黃骨髓可轉變為紅骨髓，重新恢復造血的能力。

骨髓有什麼作用

人體內的血液成分處於一種不斷的新陳代謝中，老的細胞被清除，生成新的細胞，骨髓的重要功能就是產生生成各種細胞的幹細胞，這些幹細胞通過分化再生成各種血細胞如紅細胞、白細胞、血小板、淋巴細胞等，簡單的說骨髓的作用就是造血功能。因此，骨髓對於維持機體的生命和免疫力非常重要。

6、單克隆抗體中的骨髓瘤細胞從哪裡提取?是不是在提取小鼠的免疫細胞的胰臟中？

不是提取小鼠胰臟中免疫細胞。是從骨髓中提取癌變的細胞，這類細胞具有永生性，骨髓瘤細胞在體外培養條件下無限增殖，但不能產生抗體。B淋巴細胞能產生抗體，不能在體外增殖。二者融合以後就能無限增殖又能產生抗體。

7、骨髓的基因組提取可以用提取血液基因組的試劑盒嗎

這個好像不可以，因為它們的成分不同，你需要查一下相關的資料的。具體的步驟可以參考下面的：1.根據白細胞計數(個體每個細胞約含6pg基因組DNA，要獲得30L gDNA 約需5×106個白細胞):取外周血5～30ml或骨髓1～6ml，加入0.1體積的2%EDTA， pH7.4，混勻。  2.抗凝血和骨髓於1500r/min離心10分鍾，去上層血漿。 3.加入2倍體積的紅細胞裂解液， 顛倒離心管使其混勻，於1500r/min 離心10分鍾，棄去含Hb的上清，再加入5～10ml 紅細胞裂解液， 同樣混勻、離心、棄上清。  4.加入10ml PBS重懸白細胞沉澱，於1500r/min離心10分鍾。棄上清。  5.加入2ml TES溶液重懸白細胞沉澱。  6.吸取白細胞液加入6ml DNA提取緩沖液中，邊加邊混勻。 7.加入蛋白酶K至終濃度為100～200mg/L，於37℃消化過夜或45～55℃消化3～4小時，其間振搖幾次。  8.加入等體積飽和酚抽提，來回顛倒離心管並適當振搖以使其混勻，如太粘稠可追加適量TES溶液，於3500r/min離心10分鍾， 吸取含DNA的水相至另一離心管。  9.加入等體積酚/氯仿/異戊醇(25∶24∶1) ，同上混勻，於2500r/min離心5～10分鍾，余同上一步驟，可重復1～3次。10.加入等體積氯仿/異戊醇，混勻，2500r/min 離心5分鍾， 吸取水相DNA至小燒杯中；加入0.2體積的10mol/L醋酸銨， 混勻；加入2倍體積無水乙醇，混勻；DNA自然沉澱出來，倒去液體。  11.加入10～20ml  70%乙醇洗DNA， 重復1～2次，每次均倒去液體，讓DNA小塊於室溫乾燥， 但不可過度乾燥，以防其難於溶解。  12.加入1～10ml TE， pH8.0， 於室溫或55℃水浴溶解DNA；再加入0.5體積7.5mmol/L醋酸銨， pH7.5，混勻；加入2倍體積無水乙醇， 混勻；沉澱DNA後倒去液體， 同樣用70%乙醇洗DNA 2～3次， 再使DNA小塊乾燥。  13.用適量TE，pH8.0， 溶解DNA， 濃度以0.4～0.6g/L (ug/uL)為宜，於4℃保存。

8、骨髓如何抽取？

朋友，詳細介紹給你了， 1．骨髓是人體的造血組織，位於人體許多骨骼內．成年人的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓．紅骨髓能製造紅細胞、血小板和各種白細胞．血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，抱括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能製造抗體。因此，骨髓不但是制血器官，它還是重要的免疫器官。黃骨髓主要是脂肪組織，當人體貧血時，它可以轉化為紅骨髓。 2．捐獻骨髓會不會影響捐獻者的身體健康？ 捐款骨髓不會影響人的健康。許多人認為捐獻骨髓是抽取脊髓，這完全是一種誤解。骨髓移植是需要人體內的紅骨髓——造血幹細胞。一個成年人的造血幹細胞是3公斤，一名捐獻者提拱不到10克的骨髓幹細胞就能救活一名白血患者、因此不會減盡弱其免疫能力和造血能力。骨髓是在生能力很強的組織，對於健康捐獻者，會在10天左右即可補足所捐獻的幹細胞量。 3．健康者在什麼年齡段適合捐獻骨髓？ 健康者在18～55歲均可捐獻骨髓。 4．什麼是骨髓移植？ 骨髓移植是指把骨髓中的造血幹細胞從一個人體內移植到另一個人體內（一般是通過靜脈輸入）。確切地說，骨髓移植就是造血幹細胞的移植。 5．什麼人需要進行骨髓移植？ 人體血液系統及免疫系統的嚴重疾病，如白血病（俗稱血癌）。淋巴瘤、再生障礙性貧血地中海貧血、重病放射病患者，繼續生存的希望就是骨髓移植。我國每年約400萬名各類疾病的患者等待著骨髓移植。 除了對捐獻者的休重、血壓等身體健康程度和獻血條件一樣外，捐獻骨髓者一般要求在18周歲以上、45周歲以下，最好有獻血或捐獻血小板的經歷，一旦抽樣，配對也要求是身體、心理等都較成熟者，以便於救治患者，從嚴格意義上來說，捐髓實際上是捐獻造血幹細胞，一次性捐獻量約20克左右，對身體沒有影響，市民可在義務獻血的同時填寫一張自願捐髓表，這樣醫院將有關資料輸入信息庫後，可隨時約請志願者救死扶傷。 樣捐獻骨髓 1.如何成為志願捐獻者？ 如果您年齡在18至55歲之間、身體健康，可撥打中華骨髓庫骨髓捐獻熱線電話：（北京）010－65126600，（上海）021－62478117，或到區縣級以上紅十字會報名，並填寫志願捐獻書及有關表格。 2.捐獻骨髓有哪些步驟？ 1）報名後，骨髓庫或紅十字會安排您驗血5毫升，並將化驗的HLA分型結果儲存在中國造血幹細胞捐獻者資料庫中，供患者尋找配對。 2）供者與受者初步配型相同，骨髓庫的工作人員會向您詳細介紹捐獻過程，同時請您接受全身檢查。 3.如何抽取骨髓？ 抽取骨髓造血幹細胞有兩種方法：一是醫生在供者的髂骨部位穿刺採集骨髓中的造血幹細胞，術後一兩天內有些疼痛，一周內就可完全恢復。二是用科學的方法有效地動員骨髓和其他部位的造血幹細胞大量釋放到外周血液中去，從供者的手臂靜脈中採集，並通過機器將造血幹細胞分離出來，剩餘的血液回輸到供者體內。 4.捐獻骨髓會不會影響身體健康？ 許多人認為捐獻骨髓是抽取脊髓，這完全是一種誤解。骨髓移植需要的是人體內的紅骨髓——造血幹細胞。一個成年人的骨髓重量為3公斤，一名供髓者提供不足10克的骨髓造血幹細胞就能挽救一名白血病患者的生命。骨髓是再生能力很強的組織，一般健康者捐獻造血幹細胞後在十天左右即可補足所捐的幹細胞量。因此，捐獻骨髓不會影響人的身體健康。

9、幹細胞是從自己身上提取的嗎？

有的是從自體脂肪，慢生命是通過異體來源於新生兒臍帶組織或者臍血