1、小鼠骨髓細胞染色體標本制備和觀察實驗報告
首先要提前2小時向小鼠注射秋水仙素,處死小鼠,剪下四肢,剔除肉等,剪碎骨,加生理鹽水,離心取細胞(離心管底部),再經低滲處理,染色,滴冰片,鏡檢。很麻煩,具體的你可以去圖書館查閱相關資料(動物染色體制備)。
2、在骨髓染色體標本制備實驗中,低滲的作用是什麼?
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3、植物染色體標本的制備的注意事項
植物染色體製片技術是植物細胞遺傳學、染色體工程、植物細胞生物學、植物細胞分類學和物種生物學等眾多學科的基本實驗技術。植物染色體的研究由於和植物遺傳育種工作的結合而獲得良好的發展。因此,植物染色體的技術在這些研究工作中具有特別重要的意義[1-3]。Belling(1921)提出染色體壓片技術後,植物壓片已成為植物染色體研究中廣泛應用的常規技術[1]。但是由於植物細胞有很堅實的細胞壁,染色體很難像動物染色體那樣平整地貼在載玻片上。陳瑞陽(1982)提出了植物染色體標本制備的酶解去壁低滲法。本文以韭蘭為材料,對植物染色體常規壓片,去壁低滲法製片技術、染色效果進行了比較,以期在不同的材料及條件下選擇適宜的染色體製片技術,從而獲得較好的效果。
1 材料與方法
1.1 供試材料 試驗用植株由校園內採集。
1.2 根尖製片
1.2.1 常規壓片 通常是在早上9-10點採集蔥蘭的根然後在室溫下放入0.1%秋水仙素溶液中進行預處理處理8 h。然後就在常溫把材料放在卡諾氏固定液下固定10m,接下來就在1 mol/L鹽酸溶液中解離到松軟剛合適為止。最後是用蒸餾水將蔥蘭根沖洗干凈,這樣前處理就結束。處理完後就可以用醋酸洋紅染色或改良苯酚品紅染色[4]。壓片/塗片後選取典型的染色體,在40倍物鏡及油鏡下顯微照相。
1.2.2 去壁低滲法 去壁低滲法也是把材料放0.1%秋水仙素溶液中進行預處理處理8 h。然後前低滲即是將根尖放在0.075 tool/L KCI低滲液中,在20~25℃條件下處理0.5h。接下來就是最關鍵的去壁,倒去KCI溶液,加入2.5%混合酶液,在25~30℃溫度下處理2~5 h左右。去壁後要進行後低滲,使細胞完全脹,即是用20~30℃蒸餾水慢慢沖洗2~3次後,再將根尖放在0.075 tool/L KCI低滲液中處理。
4、骨髓細胞染色體標本制備時,冰片滴片時滴液高度有什麼要求
20cm以上(醫學模擬實驗答案
5、小白鼠細胞染色體標本為什麼要選擇骨髓細胞
主要是因為小白鼠骨髓細胞染色體都為近端著絲粒染色體!在顯微鏡的觀察下呈現U型或者V型!
6、小鼠骨髓細胞染色實驗中有哪些材料可用作制備染色標本,其基本特性是什麼
在明視野下,若能看清的話就不要染色了。因為在無法觀測清楚時,才會染色。通常染色劑會影響微生物的活性,更多的是使細胞死亡。即使是活性染料也有一定的影響。 根據經驗 不染色完全可以看見顯微結構 細胞膜 細胞壁 液泡 核 基本可以看見 葉綠體隱約可以看見 當然解析度和光圈大小需要調整到最佳狀態 鞭毛可以隱約看見 黴菌放線菌細菌的形態當然是不染色完全可以看 如果想看更細致些 比如線粒體 高爾基體 核膜 微囊體 膜泡等亞顯微結構 需要用特定的分子染料進行染色再進行觀察 如果你不需要做活體實驗而只是觀察的話,染色吧,清晰度好一些。
7、制備良好的動物染色體標本應注意哪些問題?為什麼?
1)動物的選擇抄,一般用小鼠襲,其繁殖能力強,易於飼養.我們常用的是它們的骨髓細胞和精巢,因其分裂指數較高,不用體外培養就可以得到分裂中期的細胞.
2)秋水仙素用量要注意,太多或處理時間過長,會導致染色體的過分凝縮或著絲點裂解,最終會引起染色體形態不正常,甚至被破壞或溶解。
3) 低滲處理很關鍵。低滲液的量、處理時間均與細胞的數量有關。低滲過度,細胞會破裂;低滲不足則染色體在一起,分散不開。
4) 離心速度或離心時間也能影響染色體標本的制備。離心速度過大或離心時間過長,則會引起細胞破裂;反之,離心速度過小或離心時間過短,則細胞沉降不下來,則會引起大量細胞的丟失。
5) 固定液要隨用隨配,固定徹底後再打散細胞團塊,否則細胞容易破碎,染色體分散亦受到影響。
6) 載玻片要預冷.冷卻不夠,則會影響染色體的附著和鋪展。
7) 用吸管吹散細胞時用力必須盡量輕柔,用力過大則會造成細胞破裂,而染色體也會彌散在溶液中,在隨後的離心中將會丟失。
8) 滴片時的高度很重要,高度過低細胞不會破裂;過高則染色體過於分散甚至丟失,無法辨別出染色體的准確數量。
8、制備骨髓細胞染色體標本是怎樣的
因為在之前你得到的染色體都處於不同的分裂期,預固定是為了使這些細胞及其染色體都固定在當前所處的時期,便於觀察。
9、小鼠骨髓細胞的染色體標本一般制備成什麼片
小鼠骨髓細胞的染色體標本一般制備成什麼片
首先要提前2小時向小鼠注射秋水仙素,處死小鼠,剪下四肢,剔除肉等,剪碎骨,加生理鹽水,離心取細胞(離心管底部),再經低滲處理,染色,滴冰片,鏡檢.很麻煩,具體的你可以去圖書館查閱相關資料(動物染色體制備).
10、制備小鼠骨髓染色體標本過程中有哪幾個主要步驟影響製片結果
在制備小鼠骨髓細胞染色體標本過程中以下幾個步驟需要注意:
提前3-4小時候注射秋水仙素,時間太長或者太短都會影響染色體中期的數目和形態。
在低滲過程中時間和吹打都很重要,低滲過度染色體膨脹,染色後肥肥的,低滲時間不過染色後染色體顏色很深看不出條帶。
滴片,如果是教學的實驗,要求玻片是冰的,而且要傾斜,滴的高度一般在25-30CM,滴完要過酒精燈,讓固定液蒸發。滴的數量不要太多否則會重疊.如果是醫院里的染色體製片有專門的滴片機。
小鼠骨髓細胞染色體標本製作:
原理:
由於小鼠四肢骨內骨髓細胞中的造血幹細胞是生成各種血細胞和原始細胞,具有高度的分裂能力,本實驗採用這一材料,通過前處理,低滲,固定,製片,染色等步驟製得染色體標本,可觀察到許多處於分裂中期的染色體,可以進行染色體組型分析;
試劑、試劑盒:秋水仙素、姬姆薩染液、固定液、低滲液、生理鹽水;
儀器、耗材:天平、離心機、恆溫培養箱、顯微鏡;
實驗步驟
一、材料和方法
1. 材料:小白鼠。
2. 設備:天平,離心機,恆溫培養箱,顯微鏡。
3. 葯品:秋水仙素,姬姆薩染液,固定液,低滲液,生理鹽水。
二、步驟
秋水仙素處理--取骨髓--低滲處理--固定--離心--再固定--再離心--滴片--染色--鏡檢--封片。