1、骨髓細胞培養,有哪些細胞是貼壁的
而不是有些人說的。 而有些細胞可以懸浮生長這是由細胞的性質特點決定的。 有些細胞是必須要附著在支持物上才可以生長的。 這些細胞的生長都是需要添加血清的,比如肝細胞,胃上皮細胞等等,比如骨髓細胞白,血病細胞等等,加入血清後會貼壁
2、如何提取小鼠骨髓細胞?
1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠),放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後,拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨,用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚,用眼科剪小心剪開皮膚,並分離兩下肢的皮膚,往下在腳踝處剪斷,往上在髖關節處剪斷,這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉,分別剪下Femurs(大腿骨)and Tibias(脛骨),剪去兩端軟骨,露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器,每支吸取1mlHBSS液,並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔,沖洗骨髓腔以獲得骨髓,一般用2-3ml培養基沖洗兩次,可沖出絕大部分細胞。
5、過濾:用2OO目的濾網過濾,將濾網的中央插入到離心管裡面25px處,然後用注射器吸取骨髓液,慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中,去除殘渣。
6、離心:將離心管放置離心機中離心10分鍾(1350r/min)
7、去上清,加入1ml紅細胞裂解液ACK,靜置3分鍾,再加9ml HBSS溶液,進行離心10分鍾,棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次,室溫,1350r/min離心10分鍾。計數活細胞,用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基,然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇,
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻,24孔板鋪板培養,每個孔1ml.
3、大鼠骨髓來源巨噬細胞原代培養需要貼壁2個小時就換液嗎
大鼠骨髓來源巨噬細胞原代培養需要貼壁2個小時就換液
系統名稱應明確標明:酶的底物及所催化的反應性質.如果有兩個底物都應寫出,中間用冒號隔開.此外,底物的構型也應寫出.
如谷丙轉氨酶,其系統名稱為L-丙氨酸:α-酮戊二酸氨基轉移酶;
再例如對催化下列反應酶的命名.?
ATP+D-葡萄糖→ADP+D-葡萄糖-6-磷酸
該酶的正式系統命名是:ATP:葡萄糖磷酸轉移酶,表示該酶催化從ATP中轉移一個磷酸到葡萄糖分子上的反應.它的分類數字是:E.C.2.7.1.1,E.C代表按國際酶學委員會規定的命名,第1個數字(2)代表酶的分類名稱(轉移酶類),第2個數字(7)代表亞類(磷酸轉移酶類),第3個數字(1)代表亞亞類(以羥基作為受體的磷酸轉移酶類),第4個數字(1)代表該酶在亞-亞類中的排號(D葡萄糖作為磷酸基的受體).
如果其中一個底物是水,可以省去不寫,如D-葡萄糖-δ-內酯水解酶,不必寫成D-葡萄糖-δ-內酯:水水解酶.
4、骨髓細胞有哪些可以培養的細胞系
那就多了,大多數惡性血液病癌細胞都算。細胞系(cell line)指原代細胞培養物經首次傳代成功後所繁殖的細胞群體。 也指可長期連續傳代的培養細胞。(由此便引申出了後來的有限細胞系(FiniteCellLine)、無限細胞系(InfiniteCellLine)),因此,細胞系狹義的是指可連續傳代的細胞(特定環境下口語和書面語都使用),廣義是指可傳代的細胞
中文名稱:細胞系
外文名稱:cell line
經過40-50次分裂的渡過第二次死亡危機的細胞,稱之為細胞系。如細胞系的生存期有限,則稱之為有限細胞系(FiniteCellLine);已獲無限繁殖能力的細胞系,稱連續或無限細胞系(InfiniteCellLine)。無限細胞系大多已發生異倍化,具異倍體核型,可能成為惡性細胞,因此本質上已是發生轉化的細胞系。無限細胞系有永生性(不死性),但仍保留接觸抑制和無異體接種致死;有的有永生性,異體接種有致瘤性,說明已惡性化。由某一細胞系分離出來的、在性狀上與原細胞系不同的細胞系,稱亞系(Subline)。
5、骨髓基質細胞原代培養好做嗎
原代細胞(primarycell)是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞並在體外進行模擬機體培養的細胞,稱為原代細胞。一般認為,培養的原代的第1代細胞和傳代到第10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。在人工條件下使其原代細胞生存、生長、繁殖和傳代,進行細胞生命過程、細胞癌變、細胞工程等問題的研究。細胞株(cellstrain)是通過選擇法或克隆形成法從原代培養細胞中獲得具有特殊性質或標志物的細胞稱為細胞株。一般認為,細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。細胞系(cellline)是原代細胞經首次傳代成功後即為細胞系。泛指一般可能傳代的細胞。其中能夠連續傳代的細胞叫做連續細胞系或無限細胞系,不能連續培養的稱為有限細胞系。大多數二倍體細胞為有限細胞系。由原先存在於原代培養物中的細胞世系所組成。如果不能繼續傳代,或傳代次數有限,可稱為有限細胞系(finitecellline),如可以連續培養,則稱為連續細胞系(continuouscellline),培養50代以上並無限培養下去。人類腫瘤細胞,在體外培養半年以上,生長穩定,並連續傳代的即可稱為連續性株或系。
6、骨髓瘤細胞與進行原代培養的細胞相比,該物質發生的主要變化是
骨髓瘤細胞具有無限增殖的特點,原代培養細胞經反復傳代後,也可轉變為回瘤細胞或永答久細胞,骨髓瘤細胞和原代培養細胞相比,主要變化在細胞核內的染色體上,骨髓瘤細胞之所以可以無限增殖,而不發生凋亡,主要是端粒酶的作用。
7、骨髓細胞經培養後是否能真的變成精子?
不可能 精子只能由精原細胞通過減數分裂產生的
8、臨床:白血病。取材:骨髓。 方法:細胞培養+G顯帶。分析20個染色體分裂相:
這個報告結果的意思是:
染色體檢查總共計數20個細胞分裂相,其中有14個分裂相結果是: 染色體總數46條,其中性染色體是XY,即男性同時未發現染色體異常。
另外6個分裂相是:染色體總數46,性染色體為XY,存在染色體異常,異常表現為: 9號染色體和17號染色體存在意味,即9號染色體和17號染色體相互交換了整條染色體臂並組成了新的穩定染色體。
綜上,標本是由兩種核型組成的嵌合體,且是平衡易位,可能在遺傳中不會造成致死性死胎,流產之類,但是有可能產生具有家族種質性的腫瘤,因為這個核型是能穩定遺傳的,而且不會產生致死性畸變。建議對整個家族進行篩查,以先證者為起點,對家系進行研究,可以確定腫瘤和一行核型的聯系。