1、若要制備雜交瘤細胞，需取免疫後小鼠的B淋巴細胞（染色體數目40條），
雜交瘤細胞中有一個細胞核，染色體數目最多是100條。如果寫200條也合理。
有絲分裂後期，著絲點斷裂後，染色體數目加倍到200條。
2、穿心連對血小板生成有負作用嗎
查來的：粒細胞集落刺激因子(G-CSF)、粒／巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)等造血因子的應用，嚴重的粒細胞減少得以改善，而因血小板減少導致的出血則成為一直困擾臨床醫生的一個難題。血小板減少，嚴重地限制了臨床上放、化療的治療劑量，從而影響了一些對放、化療敏感的腫瘤的治療效果。雖然輸注新鮮濃集血小板懸液可以減少嚴重出血的危險，但也不可避免地增加了血源性感染、發熱反應和產生輸血相關的抗血小板抗體的概率，而且輸注血小板費用昂貴，因此通過骨髓巨核細胞生成的刺激可能更是一個合理的選擇。1994年血小板生成素(ThrombopoietinTPO)被克隆純化成功，TPO作為一種特異性的細胞因子，已被證實是一種巨核細胞生成和血小板生成的刺激和調節因子，TPO在體外可以刺激巨核細胞克隆的生成，使巨核細胞分化標志物增多，在正常動物中應用TPO可以極大地增加循環血中血小板計數，同時使骨髓巨核細胞數目和體積增加。如何將TPO更有效地用於臨床，國內外專家進行了多種償試，積累了經驗，但尚未有最後定論。本課題中我們通過放化療造成骨髓受抑制、血小板減少的小鼠模型，之後在不同時間給予重組人血小板生成素()，通過觀察小鼠血小板和骨髓巨核細胞數的變化情況，來研究rhTPO對放化療後骨髓受抑制小鼠血小板以及骨髓巨核系統的刺激生成作用，並通過不同給葯方式來比較治療效果，以找出最佳給葯方法。材料與方法採用動物試驗方法，實驗0天一次性給與Balb／C／J』鼠3．SGyX線照射及50mg／kg卡鉑腹腔內注射製成骨髓受抑制、血小板減少模型，小鼠分為三個治療組h＝10人採用放化療前、後持續給葯（Pre」OSt組X放化療前給葯（Pre組人放化療後給葯口OSt組）等三種不同給葯方式，分別於實驗一5－＋9天、－5——1天、門一門4天皮下注射rhTPO矚0卜少kgl天人設對照組＊組，n習0L注射生理鹽水。觀察以下指標①血小板下降的最低值；②血小板持續低下時間t；（血小板小於基礎值30％入③血小板恢復時間以血小板恢復至基礎值50％八④小鼠胸骨骨髓病理，計數巨核細胞數（Mmm勺進而比較各治療結果的差異。實驗結果l一用葯後血小板uLT）數量的變化：Pre」OSt組及Pre組自應用hTOP後第3天起，PLT開始升高，第6－7天達到高峰，平均值升高3－4倍。實驗0天放化療後，Pe／Post、Pre、PostJontrol四個組PLT開始有不同程度的下降，結果是：①PLT最低值分別為223。犯、1揚L28、217S30、77。二3（X10』／L）（與對照組相比P值均＜0．00l），②t；分別為l．7、3．3、l．5、6．5（天）（與對照組相比P值為＜o．OO二，＜o．05，＜O．00且）；③。為15、17．7上互．7、22（天）（與對照組相比P值為＜0．00，＜0．05，＜0．001）。2．骨髓巨核細胞計數：於實驗第9＊天檢測小鼠胸骨病理標本，結果第9天時Pre組及Pe／POSt組與對照組比較骨髓巨核細胞數明顯升高u＜0．001人在第15天時POSt組骨髓巨核細胞數顯示了明顯升高的趨勢。·2·討論TPO是由332個氨基酸組成的糖蛋白，為原癌基因C－MPI的配體，主要產生於肝臟和腎臟。TPO的主要生物活性，也是最先發現的生物活性，是促進巨核細胞的成熟和血小板的生成，TPO作為一種造血細胞生長因子在正常動物中具有相對的譜系特異性，而對骨髓抑制的小鼠，TPO治療不僅可以加速血小板的恢復，也可以加速紅細胞和中性粒細胞的恢復。本研究給予小鼠一定劑量的放化療造成小鼠骨髓抑制後，選擇了三種不同的rhTPO給葯方法實驗。結果放化療使對照組小鼠的血小板和白細胞迅速出現下降，分別於第9天和第11天降至最低，為基礎值的10．4％和9．5％，分別經過22天和19．3天恢復到了基礎值的50％（或以上人對照組的骨髓巨核細胞也在放化療後受到明顯的抑制。rhTPO治療組顯示了明顯的升血小板的作用，與對照組相比在血小板下降最低值、血小板恢復速度等指標上均顯示了較好的療效，POSt組及Pre／Post組與對照組相比則差異顯著。許多研究都證明了TPO的生血小板作用。Grossmann等以1－20KU門／鼠一9pyks）的不同劑量給正常小鼠連續注射7天治療，在低劑量時表現出劑量依賴性的血小板增多，於第5天血小板數開始增加，8刁o天達到峰值。我們在實驗中放化療處理前給予rhTPO組也在5－7天內血小板數升高了3倍以上，顯示了hO對正常小鼠明顯升血小板作用。在對骨髓抑制小鼠的研究中Grossmann等用TPOSKU或的劑量治療仍然得到了劑量依賴性模式的血小板計數的恢復，包括血小板最低點的升高和恢復的加快，但是各劑量之間的差異並不顯著。Neelis等以5GyX線（亞致死量）照射恆河猴，使其骨髓造血抑制，在給予rhTPO門0pg／kg．d．二一Zld）治
3、小鼠骨髓瘤細胞與造血幹細胞的染色體數目均可呈周期性變化嗎
A、蛙的復紅細胞進行無絲制分裂，無染色體出現；表皮細胞已高度分化，不再分裂，沒有細胞周期，A錯誤；
B、由於小鼠骨髓瘤細胞與胚胎幹細胞都能連續進行細胞分裂，具有細胞周期，所以兩類細胞的染色體數目均可呈周期性變化，B正確；
C、牛的精細胞已經過減數分裂，不再分裂，沒有細胞周期；精原細胞自身增殖時，進行有絲分裂，具有細胞周期，C錯誤；
D、人的胚胎幹細胞能夠進行連續的細胞分裂，具有細胞周期；人的成熟的紅細胞不再分裂，沒有染色體的出現，D錯誤．
故選：B．
4、如何取小鼠骨髓細胞
1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後，拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨，用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚，用眼科剪小心剪開皮膚，並分離兩下肢的皮膚，往下在腳踝處剪斷，往上在髖關節處剪斷，這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉，分別剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（脛骨）,剪去兩端軟骨，露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔，沖洗骨髓腔以獲得骨髓，一般用2-3ml培養基沖洗兩次，可沖出絕大部分細胞。
5、過濾：用2OO目的濾網過濾，將濾網的中央插入到離心管裡面25px處，然後用注射器吸取骨髓液，慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中，去除殘渣。
6、離心：將離心管放置離心機中離心10分鍾（1350r/min）
7、去上清，加入1ml紅細胞裂解液ACK，靜置3分鍾，再加9ml HBSS溶液，進行離心10分鍾，棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次，室溫，1350r/min離心10分鍾。計數活細胞，用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基，然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇，
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻，24孔板鋪板培養，每個孔1ml.
5、如何提取小鼠骨髓細胞?
1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後，拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨，用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚，用眼科剪小心剪開皮膚，並分離兩下肢的皮膚，往下在腳踝處剪斷，往上在髖關節處剪斷，這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉，分別剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（脛骨）,剪去兩端軟骨，露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔，沖洗骨髓腔以獲得骨髓，一般用2-3ml培養基沖洗兩次，可沖出絕大部分細胞。
5、過濾：用2OO目的濾網過濾，將濾網的中央插入到離心管裡面25px處，然後用注射器吸取骨髓液，慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中，去除殘渣。
6、離心：將離心管放置離心機中離心10分鍾（1350r/min）
7、去上清，加入1ml紅細胞裂解液ACK，靜置3分鍾，再加9ml HBSS溶液，進行離心10分鍾，棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次，室溫，1350r/min離心10分鍾。計數活細胞，用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基，然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇，
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻，24孔板鋪板培養，每個孔1ml.
6、由小鼠的B淋巴細胞（染色體數目40條）和小鼠骨髓瘤細胞（染色體數目60條）制備的雜交瘤（問題補充）
人家問的是常規下的染色體數，你硬是去分析有絲分裂後期，怎麼行呢。再者，細胞處於分裂期的時間很短，別說分裂後期了。
7、下列選項中，兩類細胞的染色體數目均可呈周期性變化的是
選擇來B
「細胞的染色體數源目均可呈周期性變化」是指可以進行有絲分裂或是減數分裂
A蛙的紅細胞與淋巴細胞--------蛙的紅細胞屬於無絲分裂，無周期性變化，細胞核先伸長，從核的中部向內凹進，縊裂成為兩個細胞核
C人的胚胎幹細胞與成熟紅細胞---------哺乳動物的成熟紅細胞沒有細胞核，無法進行有絲分裂
D牛的精細胞與精原細胞-----------精細胞是單倍體細胞，不能再分裂了
8、兩類細胞的染色體數目均可呈周期性變化的是
A
A.蛙不屬於哺乳動物，故其紅細胞有細胞核；
B.小鼠骨髓瘤細胞可以無線增值， 無限增值的細胞就是癌細胞，由於癌細胞內的原癌基因被激活，不在受有機體的控制，不停的在增值，由於癌細胞表面的糖蛋白減少，還很容易轉移；
C.人的成熟紅細胞無核，不存在分裂；
D.牛精原細胞進行減數分裂，精細胞不能進行分裂。
必修1《分子與細胞》這樣定義：「細胞周期是連續分裂的細胞，從一次分裂完成到下一次分裂完成為止，這是一個細胞周期。」那麼減數分裂符合這個概念嗎？我認為減數分裂沒有細胞周期。因為細胞周期的概念中有一個明確的定語修飾：連續分裂的細胞。由此可見，細胞周期是針對有絲分裂而言的。持不同觀點的同行這樣反問：減數分裂不也是經歷了兩次連續分裂，怎麼會沒有周期之說?對於減數分裂一定要注意：減數第一次分裂和減數第二次分裂共同叫做「一次減數分裂」，經過減數分裂後所產生的子細胞，沒有也不再進行連續的分裂。而且細胞周期概念中還有一個「周期性」的內涵：一個周期後產生的子細胞又恢復到了初始狀態（染色體解螺旋，條數不變），然後馬上進入下一個周期。從這個意義上講，減數第一次和第二次分裂的連續已經失去了周期性。所以減數分裂無所謂的細胞周期。