1、如何提取小鼠骨髓細胞?
1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後，拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨，用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚，用眼科剪小心剪開皮膚，並分離兩下肢的皮膚，往下在腳踝處剪斷，往上在髖關節處剪斷，這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉，分別剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（脛骨）,剪去兩端軟骨，露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔，沖洗骨髓腔以獲得骨髓，一般用2-3ml培養基沖洗兩次，可沖出絕大部分細胞。
5、過濾：用2OO目的濾網過濾，將濾網的中央插入到離心管裡面25px處，然後用注射器吸取骨髓液，慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中，去除殘渣。
6、離心：將離心管放置離心機中離心10分鍾（1350r/min）
7、去上清，加入1ml紅細胞裂解液ACK，靜置3分鍾，再加9ml HBSS溶液，進行離心10分鍾，棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次，室溫，1350r/min離心10分鍾。計數活細胞，用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基，然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇，
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻，24孔板鋪板培養，每個孔1ml.
2、如何取小鼠骨髓細胞
1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後，拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨，用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚，用眼科剪小心剪開皮膚，並分離兩下肢的皮膚，往下在腳踝處剪斷，往上在髖關節處剪斷，這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉，分別剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（脛骨）,剪去兩端軟骨，露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔，沖洗骨髓腔以獲得骨髓，一般用2-3ml培養基沖洗兩次，可沖出絕大部分細胞。
5、過濾：用2OO目的濾網過濾，將濾網的中央插入到離心管裡面25px處，然後用注射器吸取骨髓液，慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中，去除殘渣。
6、離心：將離心管放置離心機中離心10分鍾（1350r/min）
7、去上清，加入1ml紅細胞裂解液ACK，靜置3分鍾，再加9ml HBSS溶液，進行離心10分鍾，棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次，室溫，1350r/min離心10分鍾。計數活細胞，用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基，然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇，
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻，24孔板鋪板培養，每個孔1ml.
3、請描述破壞蛙骨髓的方法（至少兩種）
蛙骨髓細胞染色體玻片標本的製作 一、實驗目的 1、了解動物細胞染色體製片的原理。 2、學習蛙骨髓細胞染色體製片的方法。 3、觀察蛙染色體的數目和形態。二、實驗原理小型動物染色體製片最好、最有效的材料就是骨髓組織。在骨髓細胞中，有絲分裂指數相當高，可直接得到中期細胞。為提高有絲分裂指數，實驗前，於動物腹腔內注射一定量的秋水仙素溶液，取骨髓後，經低滲處理、固定、滴片、空氣乾燥後即可獲得良好的中期分裂相。三、實驗材料、蛙類四、器具及葯品注射器，離心管、解剖器、離心機，冰箱、電子天平，顯微鏡，搪瓷缸，載玻片，燒杯，滴管，秋水仙素，KCl，甲醇、冰乙酸，乙醇。五、實驗步驟一離心法（適合於個體大的蛙） 1、前處理目的：改變細胞質的粘度，抑制或破壞紡錘體的形成，使染色體縮短和分散，獲得較多中期分裂相。實驗前8-20小時，將蛙稱重，按每克體重10-40ug的劑量（無尾類10-20ug，有尾類30-40ug）經腹腔注射秋水仙素溶液，秋水仙素溶液濃度100-1000ug/ml，按蛙大小來配。 2、取骨髓細胞將蛙麻醉，用手術剪剝開腹腔，取下四肢骨，剔凈肌肉，放到盛有0.046mol/l的KCl的小燒杯中洗一下，用鑷子夾出來，剪掉兩端關節，將裝有0.046mol/l的KCl的注射器從骨一頭插入，沖骨髓細胞於干凈的離心管內，反復沖洗幾次，直到骨變白為止。注意這一過程不要讓組織塊掉入離心管。 3、低滲處理目的：使細胞吸水膨脹，細胞膜易破裂，有助於染色體的分散。當骨髓細胞全部沖入離心管後，開始計時，即低滲開始。室溫下低滲處理30-40分鍾，在此過程中，要用吸管反復吹打。另外取預先洗凈的載玻片放入盛有蒸餾水的搪瓷缸中，置冰箱中冰凍。 4、固定目的：盡快殺死細胞，使細胞盡可能保持原有的狀況，並且還可以去掉細胞質。將離心管兩兩平衡後，對稱放入離心機內，以1000轉/分離心10分鍾，輕輕取出，棄上清液，沿管壁緩慢加入現配卡諾氏固定液6ml左右，並用吸管吹散細胞團，固定30分鍾，平衡後再離心，棄上清液，加卡諾氏固定液進行第二次固定。注意，固定液要現配，每次離心前都要平衡，離心的時間、速度均同第一次。由於每離心一次，細胞要損失30％左右，因此對個體小的蛙第二次固定也可省去，但固定次數少，細胞質不易去掉，影響效果，固定次數多，離心後細胞損失多。這一茅盾的解決有待多次實驗的摸索，原則上大型蛙可固定2-3次，小型蛙1次。
4、骨髓的基因組提取可以用提取血液基因組的試劑盒嗎
這個好像不可以，因為它們的成分不同，你需要查一下相關的資料的。具體的步驟可以參考下面的：1.根據白細胞計數(個體每個細胞約含6pg基因組DNA，要獲得30L gDNA 約需5×106個白細胞):取外周血5～30ml或骨髓1～6ml，加入0.1體積的2%EDTA， pH7.4，混勻。 2.抗凝血和骨髓於1500r/min離心10分鍾，去上層血漿。 3.加入2倍體積的紅細胞裂解液， 顛倒離心管使其混勻，於1500r/min 離心10分鍾，棄去含Hb的上清，再加入5～10ml 紅細胞裂解液， 同樣混勻、離心、棄上清。 4.加入10ml PBS重懸白細胞沉澱，於1500r/min離心10分鍾。棄上清。 5.加入2ml TES溶液重懸白細胞沉澱。 6.吸取白細胞液加入6ml DNA提取緩沖液中，邊加邊混勻。 7.加入蛋白酶K至終濃度為100～200mg/L，於37℃消化過夜或45～55℃消化3～4小時，其間振搖幾次。 8.加入等體積飽和酚抽提，來回顛倒離心管並適當振搖以使其混勻，如太粘稠可追加適量TES溶液，於3500r/min離心10分鍾， 吸取含DNA的水相至另一離心管。 9.加入等體積酚/氯仿/異戊醇(25∶24∶1) ，同上混勻，於2500r/min離心5～10分鍾，余同上一步驟，可重復1～3次。10.加入等體積氯仿/異戊醇，混勻，2500r/min 離心5分鍾， 吸取水相DNA至小燒杯中；加入0.2體積的10mol/L醋酸銨， 混勻；加入2倍體積無水乙醇，混勻；DNA自然沉澱出來，倒去液體。 11.加入10～20ml 70%乙醇洗DNA， 重復1～2次，每次均倒去液體，讓DNA小塊於室溫乾燥， 但不可過度乾燥，以防其難於溶解。 12.加入1～10ml TE， pH8.0， 於室溫或55℃水浴溶解DNA；再加入0.5體積7.5mmol/L醋酸銨， pH7.5，混勻；加入2倍體積無水乙醇， 混勻；沉澱DNA後倒去液體， 同樣用70%乙醇洗DNA 2～3次， 再使DNA小塊乾燥。 13.用適量TE，pH8.0， 溶解DNA， 濃度以0.4～0.6g/L (ug/uL)為宜，於4℃保存。