1、為什麼多發性骨髓瘤的血漿纖維蛋白原含量增加
稍微偏低。
纖維蛋白原是在肝臟產生的,降低有幾種原因,如遺傳性的纖維蛋白原的減少,肝臟的疾病造成的減少、纖溶酶對纖維蛋白原過度降解等等,都會造成臨床上纖維蛋白原的減少
血漿纖維蛋白原正常值在2g/L到4g/L之間。值升高見於糖尿病、急性心肌梗死、急性傳染病、結締組織病、急性腎炎、灼傷、多發性骨髓瘤、休克、大手術後、妊高征、急性感染、惡性腫瘤及血栓前狀態。減低見於DIC、原發性纖溶、重型肝炎和肝硬化。纖維蛋白原和纖維蛋白怎樣區別?纖維蛋白原是發現最早的一種凝血因子。呈伸長的橢球體,是由三對多肽鏈(一對α鏈、一對β鏈、一對γ鏈)以二硫鍵連接而成的二聚物,其分子量約為34萬道爾頓。在肝臟中合成後進入血漿,以溶解形式存在。每100ml人血漿中含量約0.3g。纖維蛋白是一種高度不溶的蛋白質多聚體,是象細針一樣的晶狀物。纖維蛋白原轉變為纖維蛋白是整個血凝過程中最基本的變化,要經過3個環節:①纖維蛋白原的水解在凝血酶作用下,纖維蛋白原分子中的兩條α鏈和兩條β鏈每條都有一個肽鍵斷裂,結果形成纖維蛋白單體,並同時釋放出兩對小分子的纖維蛋白多肽(即纖維蛋白多肽A和B,分子量合計約為9000道爾頓)。因此,最後形成的纖維蛋白的分子量比纖維蛋白原小些。②纖維蛋白單體的聚集在Ca2+的參與下,若干纖維蛋白單體聚合成可溶性的纖維蛋白多聚體。③血凝塊的形成在纖維蛋白酶和Ca2+的作用下,不同的纖維蛋白分子的α鏈之間形成交鍵,使纖維蛋白轉變為最終的不溶性的纖維蛋白多聚體。形成中的纖維蛋白相互交錯重疊並網羅血細胞,使原來呈溶膠狀的血液轉變成凝膠狀的血凝塊。隨後由於血小板收縮蛋白的作用,血塊縮緊變硬,並析出血清。所以,血清中除了沒有纖維蛋內原外,比血漿還增添了一些在凝血過程中產生
2、多發性骨髓瘤患者M蛋白進行分類與鑒定的最佳方法是
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3、多發性骨髓瘤m蛋白均一免疫活性高還低
M蛋白的檢測與鑒定
一、M蛋白的基礎知識
M蛋白是漿細胞或B 淋巴細胞單克隆大量增殖時所產生的一種異常免疫球蛋白,其氨基酸組成及排列順序十分均一,空間構象、電泳特徵也完全相同,本質為免疫球蛋白或其片段(輕鏈、重鏈等)。由於它產生於單一克隆(monoclone),又常出現於多發性骨髓瘤(multiple myeloma)、巨球蛋白血症(macroglobulinemia)、惡性淋巴瘤(malignantlym phoma) 病人的血或尿中,故稱M 蛋白。這些M 蛋白大多無抗體活性,所以又稱為副蛋白(paraprotein)。
M 蛋白血症可分為惡性與意義不明的兩大類。惡性M 蛋白血症多見於多發性骨髓瘤(包括輕鏈病)、巨球蛋白血症、重鏈病、7SIg M 病(Solomen -Konkel 病)、半分子病及不完全骨髓瘤蛋白病(C 端基因缺陷) 等。意義不明的M 蛋白血症(monoclonal gammopathyof undetermined significance ,M G US) 又分為兩種,一種是與其他惡性腫瘤(如惡性淋巴瘤) 伴發者,另一種即所謂良性M 蛋白血症。
M 蛋白的檢測方法主要有瓊脂或瓊脂糖電泳、免疫電泳、免疫固定電泳、選擇免疫電泳等。
二、M蛋白的鑒定
1.多發性骨髓瘤與巨球蛋白血症時的M 蛋白檢測和鑒定
(1)血清總蛋白定量。90% 的患者血清總蛋白含量升高(70% 的患者>100g/L),約10%的患者正常或甚至偏低(如輕鏈病時)。
(2)血清蛋白醋纖膜或瓊脂糖電泳。M 蛋白在電泳時出現典型的單株峰(亦稱M區帶),特點是區帶窄而濃,掃描時呈現尖高峰,在γ區高比寬≥2,在β區≥1。此M區帶可因Ig的不同而出現在在γ~α2的任何區域。M蛋白增殖的另一特點是其他各區
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帶明顯減少,顯示圖像較簡單。有時有的患者血中M蛋白並不高,這是由突變細胞的Ig分泌能力決定的。這種病人的血清在電泳時M峰可不明顯,易被其他蛋白掩蓋,需採用稀釋血清成應用其他敏感方法如免疫固定電泳來檢測。
(3)血清Ig定量。一般M蛋白所屬Ig含量均顯著增高,其他類Ig則正常或顯著減低。
(4)免疫電泳。
① 正常人血清免疫電泳結果:可分辨出20 多種蛋白成分。在陽極端有船形很濃的沉澱線為白蛋白。通常Ig組分靠陰極端,最靠近加樣孔者為Ig M,依次為IgA、IgG,三者成平滑的連續沉澱線。
② 多發骨髓瘤:多發性骨髓瘤分IgG、IgA、Ig M、IgI)和IgE5 種,IgG 和IgA 又分亞類,所有Ig的輕鏈又分兩個型。因此,免疫電泳時變形沉澱線的位置隨各分子的電泳區帶不同而異,從慢γ~β2區皆可出現。IgG 1 多出現在慢γ區,IgG 4 在β~α
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區。M 蛋白與相應的抗重鏈血清、抗輕鏈血清形成遷移范圍十分局限的濃密的沉澱弧。由於此種病人血清中Ig 含量甚高,免疫擴散時可出現抗原絕對過剩而不出現沉澱線,此時需稀釋血清重做,往往可獲得滿意結果。③ 巨球蛋白血症:由於IgM 分子大量增殖所致。在免疫電泳時,常常出現以下特徵:一是沉澱線明顯變形。正常情況下,IgM形成短小沉澱線,不易看到變形。當IgM大量出現時,則會使整個IgM沉澱線變形。二是抗原孔周圍和電泳縱軸出現團塊狀沉澱。三是電泳時IgM組分無遷移,這多是Ig M分子聚合,電泳不移動所致。
(5)尿本-周蛋白檢測。
① 定性檢測: 用熱沉澱法和磺基水楊酸法。
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② 免疫電泳法:用待檢尿濃縮後進行免疫電泳,大多數多發性骨髓瘤病人和輕鏈病患者,僅出現一條緻密的弓形彎曲的沉澱線。本法60%~80%的骨髓瘤病人和幾乎全部輕鏈病病人可檢出尿本周蛋白。
③ 輕鏈白蛋白-戊二醛交聯免疫電泳法:多發性骨髓瘤、華氏巨球蛋白血症及輕鏈病可呈陽性,正常人陰性。本法尿本周蛋白檢出率為100%,假陽性4%,尿中含有200μg/ml 時即可出現陽性結果。
2.重鏈病時M 蛋白檢測與鑒定
與多發性骨髓瘤相同,免疫電泳時由於重鏈分子較Ig 分子小,故遷移率快,電泳位置較靠陽極側(β~α)。但重鏈病一般需選擇免疫電泳證實。
3.7SIg M 病時M 蛋白的檢測與鑒定
一般Ig M 為五聚體,沉降系數為19S ,而7S IgM患者的IgM為單體,沉降系數為7S 。證明7S IgM 有兩種方法:一種是在測定Ig M 總量後,將被測血清1~2 ml 過Sepharose 6B柱,再根據洗脫峰圖用面積儀測出7S Ig M占總IgM的百分比,與Ig M總量換算即得7S IgM的絕對值。另一方法即為植物血凝素(PHA)選擇電泳。此法原理是五聚體Ig M可與PHA 結合形成沉澱,而單體IgM不與PHA結合。在瓊脂膠中加入PHA,後進行電泳,五聚體IgM 被P H A 所阻留,而7S Ig M 繼續向陽極泳動,並可與隨後加至抗體槽中的Ig M 抗血清反應,形成單一沉澱弧。
4、一個骨髓瘤表現的病人,電泳發現β和γ之間有m蛋白條帶,問可能是哪個ig
這個不好說,電泳唯一能證明得的是什麼病,哪種類型還需要其他檢測項目。
5、血M蛋白是什麼蛋白,測定有何意義?
M蛋白是B淋巴細胞或漿細胞單克隆增殖產生的大量在類別,亞類,型,亞型,基因型和獨特型皆相同的均一棉衣球擔保。由於這種單克隆蛋白多見於多發性骨髓瘤,巨球蛋白血症,惡性淋巴瘤,而這三種疾病的英文名字均以M字母開頭,因此就將這種蛋白稱為M蛋白。
M蛋白可分為惡性和意義不明倆大類。惡性M蛋白血症,多見於多發性骨髓瘤(含輕鏈病),巨球蛋白血症,重鏈病,TSLGM病,半分子病和不完全骨髓瘤蛋白病。意義不明的M蛋白血症是於其他惡性腫瘤如惡性淋巴瘤伴發者,另一種是所謂良性M蛋白血症。
M蛋白測定對於多發性骨髓瘤和巨球蛋白血症等 病的診斷和分型有重要意義。檢測M蛋白需要通過如下實驗:血清蛋白電泳,血清lg定量,棉衣電泳,血/尿輕鏈定量等。。