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骨髓幹細胞體外培養

發布時間:2020-11-14 12:44:05

1、骨髓間充質幹細胞與骨髓基質幹細胞是同一種細胞嗎

不是一種細胞,具體來源不同,但是都是幹細胞,只是分別由基質細胞、間充質分離培養得到。只知道下面這些,希望有幫助

1、間充質幹細胞(MSCs)是屬於中胚層的一類多能幹細胞,主要存在於結締組織和器官間質中,以骨髓組織中含量最為豐富,由於骨髓是其主要來源,因此統稱為【骨髓間充質幹細胞】。骨髓間充質幹細胞是胎兒和成年人保留在骨髓血液中的原始幹細胞,具有強大的生命力,能被誘導分化為血管組織和骨組織,再生能力強;未分化的間充質細胞(undifferentiated mesenchymal cell)是保留在成體結締組織內的一些較原始的細胞,它們保持著間充質細胞的分化潛能,在炎症與創傷時可增殖分化為成纖維細胞、脂肪細胞。間充質細胞常分布在小血管尤其是毛細血管周圍,並能分化為血管壁的平滑肌和內皮細胞。位於器官之間、組織之間以至細胞之間,起連接、支持、營養、防禦、保護和修復等功能。
一、具有強大的增殖能力和多向分化潛能,在適宜的體內或體外環境下不僅可分化為造血細胞,還具有分化為肌細胞、肝細胞、成骨細胞、軟骨細胞、基質細胞等多種細胞的能力。
二、具有免疫調節功能,通過細胞間的相互作用及產生細胞因子抑制T細胞的增殖及其免疫反應 ,從而發揮免疫重建的功能。
三、具有來源方便,易於分離、培養、擴增和純化,多次傳代擴增後仍具有幹細胞特性,不存在免疫排斥的特性。

2、基質細胞群包括成纖維細胞、網狀細胞及巨噬細胞等,基質細胞在體外培養可形成CFU-F。造血幹細胞被基質細胞包繞後才能增殖。血細胞是在基質細胞形成的網狀支架中增殖和分化。

小知識: 幹細胞的分類與來源

根據其發育階段,於細胞可分為胚胎幹細胞(Embryonic Stem Cell)和成體幹細胞(Alt Stem Cell)。胚胎幹細胞包括ES細胞(Embryonic Stem Cell)、EG 細胞(Embryonic Germ Cell);成體幹細胞包括神經幹細胞(Neural Stem Ce11, NSC)、血液幹細胞(Hematopoietic Stem Cell,HSC)、骨髓間充質幹細胞(Mesen chymal Stem Cell,MSC),骨髓基質幹細胞,表皮幹細胞(EPidexmis Stem Cell)等。

近年,發現不同胚層起源的成體幹細胞在一定條件下也可相互轉化。如肌肉組織的幹細胞可以「橫向分化」為血液細胞和脂肪細胞。

2、如何成為骨髓志願者

凡年齡在18-55周歲,身體健康,經下列血液檢查合格者,都可以成為造血幹細胞捐獻者。

丙氨酸氨基轉移酶(ALT)≤40單位

乙型肝炎病毒表面抗原:陰性

丙型肝炎病毒抗體:陰性

艾滋病病毒抗體:陰性

梅毒試驗:陰性

如果您適齡、身體健康(符合無償獻血條件)、志願捐獻造血幹細胞,可與各地紅十字會(或者中華骨髓庫分庫)的熱線電話聯系報名、填寫志願捐獻書及有關表格,並抽取6~8毫升血液。組織配型實驗室將會對您的血液進行HLA分型等檢驗,並把您的所有相關資料錄入中國造血幹細胞捐獻者資料庫的計算機資料庫中。這樣您就成為捐獻造血幹細胞的志願者了。

捐獻造血幹細胞一般就是捐獻骨髓,一般骨髓捐獻的採集量是50-100ml(採集直接輸入HLA匹配受體),如果是骨髓體外培養回輸的話採集量是10ml。如果想要捐獻骨髓,建議個人慎重考慮,官方聲明捐獻骨髓對身體無害,事實上捐獻骨髓對身體是有很大影響的。人體骨髓腔中含紅骨髓和黃骨髓,當人體少量失血(小於200CC)時,紅骨髓產生造血幹細胞,造血幹細胞分化成血細胞補充人體所失血細胞;當人體大量失血(小於800CC)時,人體需要及時輸血,體內少量黃骨髓轉變為紅骨髓,加速造血幹細胞的生成;當人體大量失血大於800CC時,人體極度危險,不及時輸血即死亡。人體中的紅骨髓會隨著年齡的增長而不斷減少,所以捐獻紅骨髓後,在未來的幾年裡需要合理的調理身體,紅骨髓的含量會得到一定的恢復。

3、關於造血幹細胞

1.根據我國《獻血者健康檢查要求》「……眼底有變化的高度近視等」不能獻血。
因為獻血有可能破壞眼壓平衡,輕微的血壓波動對於高度近視者可能造成血管痙攣,影響視力。
所以,從保護獻血者角度出發不提倡獻血。
2.捐獻造血幹細胞一般就是捐獻骨髓,一般骨髓捐獻的採集量是50-100ml(採集直接輸入HLA匹配受體),如果是骨髓體外培養回輸的話採集量是10ml。如果想要捐獻骨髓,建議個人慎重考慮,官方聲明捐獻骨髓對身體無害,事實上捐獻骨髓對身體是有很大影響的。人體骨髓腔中含紅骨髓和黃骨髓,當人體少量失血(小於200CC)時,紅骨髓產生造血幹細胞,造血幹細胞分化成血細胞補充人體所失血細胞;當人體大量失血(小於800CC)時,人體需要及時輸血,體內少量黃骨髓轉變為紅骨髓,加速造血幹細胞的生成;當人體大量失血大於800CC時,人體極度危險,不及時輸血即死亡。人體中的紅骨髓會隨著年齡的增長而不斷減少,所以捐獻紅骨髓後,在未來的幾年裡需要合理的調理身體,紅骨髓的含量會得到一定的恢復。

4、骨髓移植與造血幹細胞移植有什麼區別?

一、指代不同

1、骨髓移植:是通過靜脈輸注造血干、祖細胞,重建患者正常造血與免疫系統,從而治療一系列疾病的治療方法。

2、造血幹細胞移植:患者先接受超大劑量放療或化療(通常是致死劑量的放化療),有時聯合其他免疫抑制葯物,以清除體內的腫瘤細胞、異常克隆細胞,然後再回輸采自自身或他人的造血幹細胞,重建正常造血和免疫功能的一種治療手段。

二、特點不同

1、骨髓移植:使用預處理方案可以製造空間、免疫抑制以及清除疾病。預處理方案的強度以既可以達到最大限度的防止移植排斥、又可達到患者對其副作用的耐受為目標,故有多種預處理方案可供選擇。

2、造血幹細胞移植:血緣關系供者造血幹細胞移植和無血緣關系供者造血幹細胞移植(即無關移植);按移植物種類分為外周血造血幹細胞移植、骨髓移植和臍帶血造血幹細胞移植。

三、發展不同

1、骨髓移植:隨著移植技術的提高,其療效已經漸趨穩定。移植供者的選擇困難成為制約移植的主要障礙。HLA不完全相合的親屬供者、HLA單倍體相合親屬供者及無關供者的應用及相關技術改進成為臨床研究的熱門課題,非清髓技術也帶來了觀念上的革命。

2、造血幹細胞移植:有很多先進的葯物從遺傳學水賓士療這些患者,但是異基因造血幹細胞移植仍是治癒這些疾病的惟一治療手段。

5、幹細胞都在骨髓里么

幹細胞全身都存在.
人體幹細胞分兩種類型:
一種是全功能幹細胞,可直接克隆人體;另一種是多功能幹細胞,可直接復制各種臟器和修復組織。人類寄希望於利用於細胞的分離和體外培養,在體外繁育出組織或器官,並最終通過組織或器官移植,實現對臨床疾病的治療。
「原位培植皮膚幹細胞再生新皮膚技術」不僅實現了利用於細胞復制皮膚器官,而且做到了人體原位皮膚器官的復制,從而使人類從幹細胞體外培植組織成器官移植治療,直接跨入了人體原位幹細胞復制器官。科學家普遍認為:幹細胞的研究將為臨床醫學提供更為廣闊的應用前景。
幹細胞具有經培養不定期地分化並產生特化細胞的能力。在正常的人體發育環境中,它們得到了最好的詮釋。人體發育起始於卵子的受精,產生一個能發育為完整有機體潛能的單細胞,即全能性受精卵。受精後的最初幾個小時內,受精卵分裂為一些完全相同的全能細胞。這意味著如果把這些細胞的任何一個放入女性子宮內,均有可能發育成胎兒。實際上,當兩個全能細胞分別發育為單獨遺傳基因型的人時,即出現了各方面都完全相同的雙胞胎。大約在受精後四天,經過幾個循環的細胞分裂之後,這些全能細胞開始特異化,形成一個中空環形的細胞群結構,稱之為胚囊,胚囊由外層細胞和位於中空球形內的細胞簇(稱為內細胞群)所構成。
外層細胞繼續發展,形成胎盤以及胎兒在子宮內發育所需的其它支持組織。內細胞群細胞亦繼續發育,形成人體所須的全部組織。盡管內細胞群可形成人體內的所有組織,但它們不能發育為一個單獨的生物體,因為它們不能形成胎盤以及子宮內發育所需的支持組織。這些內細胞群細胞是多能性的----它們能產生許多種類型的細胞,但並非胎兒發育所需的全部細胞類型。因為它們不是全能性的,不是胚胎,沒有完全的發育潛能。如果內細胞群被放入女性子宮,它不會發育成胎兒。
多能性幹細胞經歷進一步的特異分化,發展為參與生成特殊功能細胞的幹細胞。如造血幹細胞,它能產生紅細胞、白細胞和血小板。又如皮膚幹細胞,它能產生各種類型的皮膚細胞。這些更專門化的幹細胞被稱為專能幹細胞。
幹細胞對早期人體的發育特別重要,在兒童和成年人中也可發現專能幹細胞。舉我們所最熟知的幹細胞之一,造血幹細胞為例,造血幹細胞存在於每個兒童和成年人的骨髓之中,也存在於循環血液中,但數量非常少。在我們的整個生命過程中,造血幹細胞在不斷地向人體補充血細胞——紅細胞、白細胞和血小板的過程中起著很關鍵的作用。如果沒有造血幹細胞,我們就無法存活。
幹細胞是一類具有自我更新和分化潛能的細胞。它包括胚胎幹細胞和成體幹細胞。幹細胞的發育受多種內在機制和微環境因素的影響。目前人類胚胎幹細胞已成功地在體外培養。最新研究發現,成體幹細胞可以橫向分化為其它類型的細胞和組織,為幹細胞的廣泛應用提供了基礎。
在胚胎的發生發育中,單個受精卵可以分裂發育為多細胞組織或器官。在成年動物中,正常的勝生理代謝或病理損傷也會引起組織或器官的修復再生。胚胎的分化形成和成年組織的再生是幹細胞進一步分化的結果。胚胎幹細胞是全能的,具有分化為幾乎全部組織和器官的能力。而成年組織或器官內的幹細胞一般認為具有組織特異性,只能分化特定的細胞或組織。
然而,這個觀點目前受到了挑戰。最新的研究表明,組織特異性幹細胞同樣具有分化成其它細胞或組織的潛能,這為幹細胞的應用開創了更廣泛的空間。按分化潛能的大小,幹細胞基本上可分為三種類型:一類是全能性幹細胞,它具有形成完整個體的分化潛能。如胚胎幹細胞,它是從早期胚胎內的細胞團分離出來的一種高度未分化的細胞系,具有與早期胚胎細胞相似的形態特徵和很強的分化能力,它可以無限增殖並分化成為全身200多種細胞類型,進一步形成機體的所有組織、器官。另一類是多能性幹細胞,這種幹細胞具有分化出多種細胞組織的潛能,但卻失去了發育成完整個體的能力,發育潛能受到一定的限制,骨髓多能造血幹細胞是典型的例子,它可分化出至少十一中血細胞,但不分化出造血系統以外的其他細胞。還有一類幹細胞為單能幹細胞(也稱專能、偏能幹細胞),這類幹細胞只能向一種類型或密切相關的兩種類型的細胞分化,如上皮組織基底層的幹細胞、肌肉中的成肌細胞。
總之,凡需要不斷產生新的分化細胞以及分化細胞本身不能再分裂的細胞或組織,都要通過幹細胞所產生的具有分化能力的細胞來維持肌體細胞的數量,可以這樣說,生命是通過幹細胞的分裂來實現細胞的更新及保證持續生長。
隨著基因工程、胚胎工程、細胞工程等各種生物技術的快速發展,按照一定的目的,在體外人工分離、培養幹細胞已成為可能,利用幹細胞構建各種細胞、組織、器官作為移植器官的來源,這將成為幹細胞應用的主要方向。

造血幹細胞在骨髓中有,在人體血液中也大量的存在!

6、造血幹細胞體外定向誘導分化,為什麼不用骨髓幹細胞

探討體外誘導人骨髓間充質幹細胞(human bone marrow-derived mesenchymal stem cells, hBMSCs)定向誘導分化為心肌樣細胞的實驗條件。 方法:取成人棄骨骨髓,通過全骨髓貼壁法分離培養hBMSCs。在傳至第三代時,篩選具有心肌特異性分化潛能的c-kit~+的hBMSCs細胞克隆,用含20%胎牛血清的低糖DMEM培養液繼續克隆培養。當細胞達到70%融合時,分別用10μmol/l5-氮胞苷(5-azacytidine crystalline,5-aza),100mg/l參麥注射液,10μmol/l5-氮胞苷和100mg/l參麥注射液3組誘導劑誘導hBMSCs。24小時後,更換為含10%胎牛血清的低糖DMEM培養液繼續培養。在誘導3周後,通過顯微鏡下觀察其形態變化。用免疫細胞化學方法檢測心肌特異性標記抗原Desmin和肌鈣蛋白T的表達;用RT-PCR方法檢測心肌特異基因心房利尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)和腦鈉肽(brain natriuretic peptide,BNP)表達。 結果:骨髓中含有多種hBMSCs細胞克隆,其中成纖維細胞樣克隆表達c-kit~+。分別用3組誘導劑誘導c-kit~+細胞15天後,部分細胞胞體明顯增粗,可見有些細胞間有融合樣現象發生。誘導3周後,3組都有類似肌管樣細胞出現,細胞短粗,呈不規則的圓柱形,有分支,互相連成網。蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin HE)染色後,3組細胞都排列規則,類似於心肌細胞的形態,可見部分細胞有排列規則的橫紋樣結構。免疫細胞化學顯示誘導3周後的hBMSCs,Desmin陽性細胞數目分別是:5-aza組(65.3±4.7%),參麥注射液組(62.3±3.9%),5-aza和參麥注射液組(68.5±2.1%),3組Desmin陽性細胞表達率無顯著差異; cTnT陽性細胞數目分別是:5-aza組(62.2±4.1%),參麥注射液組(63.8±3.4%), 5-aza和參麥注射液組(66.0±6.2%),3組Desmin陽性細胞表達率無顯著差異。陰性對照組和未分化的hBMSCs均無Desmin和cTnT的表達。RT-PCR顯示3種不同的誘導劑誘導hBMSCs3周後都有ANP,BNP的表達,未分化的hBMSCs無ANP,BNP的表達。 結論:5-aza和中葯可以誘導c-kit~+的hBMSCs細胞克隆分化為心肌樣細胞。體外誘導成的心肌樣細胞表現為未成熟心肌細胞的結構和功能特徵。證明骨髓中含有多種幹細胞克隆,c-kit可作為篩選hBMSCs向心肌樣細胞分化的一項檢測指標。篩選具有心肌特異性分化潛能的hMSCs可提高誘導分化率。

7、骨髓幹細胞治療能糖尿病嗎?

自體骨髓間充質幹細胞的移植不存在著任何的排異反應,安全,沒有任何的副作用,在糖尿病的治療效果上十分的好,可以很好的讓糖尿病的患者逐漸的擺脫對葯物和胰島素的依賴。
目的自體骨髓間充質幹細胞與外周血造血幹細胞共移植治療糖尿病的的安全性和療效。方法採用無血清培養體系體外培養骨髓間充質幹細胞,將骨髓間充質幹細胞與外周血造血幹細胞共移植治療5例惡性血液病。結果5例患者骨髓間充質幹細胞經體外培養擴增後,與採集的自體外周血造血幹細胞共同回輸。WBC和Plt低谷時間分別為4~7d和4~9d,造血重建(ANC≥0.5×109/L和Plt≥20×109/L)時間分別為8~11d(中位時間9d)和7~10d(中位時間8.3d)。除口腔、咽部輕度感染外,無其他嚴重的移植相關並發症。結論體外無血清培養體系可以培養擴增臨床規模的骨髓間充質幹細胞,而且自體骨髓間充質幹細胞與外周血造血幹細胞共移植治療糖尿病安全,移植後胰臟功能恢復效果好。

8、骨髓間充質幹細胞的生物學特性有哪些呀???謝謝各位啦~急用...

貼壁生長,壽命較短

9、骨髓間充質幹細胞與什麼細胞可以共培養

髓核細胞與骨髓間充質幹細胞共培養,影響髓核細胞的活知性,經共培養的髓核細胞增殖速度、蛋白多糖合成量較對照組提高明顯,髓核細胞活性上調道。 


睾丸支持內細胞與骨髓間充質干容細胞在體外共培養的早期,睾丸支持細胞可以顯著促進間充質幹細胞的生長,但在後期則反而抑制間充質幹細胞的生長。

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