動物骨髓細胞染色體畸變

1、染色體畸變有什麼影響

太有影響了
你現在還好
不過要嚴重些就容易發生各種疾病了
而且後代有畸形幾率的

2、衛生部衛監發(1998)第19號文件

發文單位：衛生部
文 號：衛監發[1998]第19號
發布日期：1998-5-11
執行日期：1998-5-11

各省、自治區、直轄市衛生廳（局），中國預防醫學科學院：

為進一步加強對涉及飲用水衛生安全產品評審工作的管理，現將《生活飲用水輸配水設備及防護材料安全性評價規定》、《飲用水化學處理劑衛生安全評價規定》、《飲水處理器衛生安全與功能評價規定》、《反滲透飲水處理裝置衛生安全與功能評價規定》印發給你們，請遵照執行。

附件：

1.生活飲用水輸配水設備及防護材料安全性評價規定

2.飲用水化學處理劑衛生安全評價規定

3.飲水處理器衛生安全與功能評價規定

4.反滲透飲水處理裝置衛生安全與功能評價規定

衛生部
一九九八年五月十一日

附件1：生活飲用水輸配水設備及防護材料安全性評價規定

1.主題內容與適用范圍

本規定規定了飲用水輸配水設備（供水系統的輸配水管、設備、機械部件）和防護材料的衛生安全性要求和監測檢驗方法。

本規定適用於與飲用水以及飲用水處理劑直接接觸的物質和產品，這些物質和產品系指用於供水系統的輸配水管、設備、機械部件（如閥門、加氯設備、水處理劑加入器等）以及防護材料（如塗料、內襯等）。

2.引用標准

GB5749－85 生活飲用水衛生標准

GB5750－85 生活飲用水標准檢驗法

GB7919－87 化妝品安全性評價程序和方法

3.內容

3.1 凡與飲用水接觸的輸配水設備和防護材料不得污染水質，管網末梢水水質必須符合GB5749－85《生活飲用水衛生標准》的要求。

3.2 飲用水輸配水設備和防護材料必須按附錄A的規定分別進行浸泡試驗。

3.3 浸泡水需按附件A的方法進行檢測。檢測結果必須分別符合表1和表2的規定。

3.4 浸泡水尚需按附錄B的方法進行下列毒理學試驗。

3.4.1 急性經口毒性試驗：LD50不得小於10g／kg體重。

3.4.2 兩項致突變試驗：基因突變試驗和哺乳動物細胞染色體畸變試驗，兩項試驗均需為陰性。

3.5 生產與飲用水接觸的輸配水設備和防護材料所用原料應使用食品級。

4.監測檢測方法：見附件A和B

附件A.1飲用水輸配水設備衛生標准檢驗方法

本方法適用於與飲用水接觸的設備浸泡水水質的檢驗

1.樣品預處理

1.1 采樣：為盡可能符合應用條件，在浸泡試驗中應使用輸配水管或有關產品的最終產品。當最終產品容積過大時，可根據具體情況，按比例適當縮小。

1.2 預處理：用自來水將試樣清洗干凈，並連續沖洗30分鍾，然後浸泡水立即浸泡。

1.3 浸泡試驗：

1.3.1 浸泡水制備：

1.3.1.1 試劑：

1.3.1.1.1 純水：用蒸餾水或去離子水，其電導率為＜2μS／cm.

1.3.1.1.2 0.025mol／L氯貯備液：取7.3ml試劑級次氯酸鈉（NaClO，50g／L），用純水稀釋至200ml，貯於密閉具塞的棕色瓶中，於20℃避光保存，每周新鮮配製。

注1：測定氯含量：取1.0ml氯貯備液，用水稀釋至1.0L，立即分析總余氯，將此值定為「A".

注2：測定所需的余氯：為了獲得2.0mg／L余氯，需要向浸泡水中加入氯貯備液的量，按下式計算：

V——需加入氯貯備液的體積，ml

B——標准浸泡水的體積，L

A——氯貯備液的濃度，mg／L

1.3.1.1.3 0.04mol／L鈣硬度貯備液：稱取4.44g無水氯化鈣（CaCl2）溶於純水中，稀釋至1.0L，充分混勻，每周新鮮配製。

1.3.1.1.4 0.04mol／L碳酸氫鈉緩沖液：3.36g碳酸氫鈉（NaHCO3）溶於純水中，並用純水稀釋至1L，充分混勻。每周新鮮配製。

1.3.1.2 浸泡水的配製：配製pH為8、硬度為100mg／L、有效氯為2mg／L的浸泡水方法如下：取25mL碳酸氫鈉的緩沖液（1.3.1.1.4）、25mL硬度貯備液（1.3.1.1.3）以及所需的氯貯備液（見1.3.1.1.2），用純水稀釋至1L.按此比例配製實際所需要的浸泡水。

1.3.2 浸泡：

1.3.2.1 浸泡條件：受試產品接觸浸泡水的表面積與浸泡水的容積之比不小於在實際使用條件下最大的比例。對於輸配水管應使用該類產品中直徑最小的。

1.3.2.2 浸泡試驗：

1.3.2.2.1 用試驗用浸泡水充滿受試水管或水箱，不留空隙，兩端用包有聚四氟乙烯薄膜的干凈軟木塞或橡皮塞塞緊，在25±5℃避光的條件下浸泡24±1小時。

1.3.2.2.2 對於機械部件，如不能在部件內進行浸泡試驗時，可將部件放在玻璃容器中浸泡，條件同上。

1.3.2.2.3 另取相同容積玻璃容器，加滿試驗用浸泡水，在相同條件下放置24±1小時，作空白對照。

1.3.3 浸泡水的收集和保存：浸泡一段時間後，立即將浸泡水放入預先洗凈的樣品瓶內。一般收集和分析間隔的時間盡可能縮短。水樣收集和保存方法：按《生活飲用水標准檢驗法》（GB5750－85）。

2.檢驗方法：按GB5750－85《生活飲用水標准檢驗法》

附件A.2與飲用水接觸的防護材料衛生標准檢驗方法

本方法適用於與飲用水接觸的防護材料浸泡水水質的檢驗。

1.樣品預處理：

1.1 試樣的制備：

1.1.1 按生產廠提供的使用條件（如塗層厚度、塗後乾燥時間等）制備試樣可將塗層塗在玻璃片上，如玻璃片不合適，可根據生產廠的建議選用。

1.1.2 取70×300mm玻璃片，洗凈烘乾。在玻璃片兩面70×120mm面積上，按實際使用厚度塗以塗料。在乾燥處自然乾燥，製成塗料片。

1.2 預處理：用自來水將試樣塗料片清洗干凈，立即進行浸泡試驗。

1.3 浸泡試驗：

1.3.1 浸泡水制備：同《飲用水輸配水設備衛生標准檢驗方法》

1.3.1條。

1.3.2 浸泡條件：試樣的表面積與浸泡水容積比為50cm2／L.如為多層塗料，則將各層塗料分別塗在玻璃片（或根據生產廠的建議選用）上，同時固定在浸泡水中。每種塗料試樣與浸泡水容積比均按50cm2／L計算。

1.3.3 浸泡：

1.3.3.1 將試驗片未塗防護塗料的部分分別插入放於玻璃容器中的玻璃固定架上，使樣片保持垂直，互不接觸；或者將試驗片懸掛於玻璃容器中。在密閉、避光25±5℃溫度條件下進行浸泡。於浸泡後1、3、5、10、20天和30天收集全部浸泡水，供檢測分析用，觀察溶出污染物濃度的衰減情況，第30天的浸泡水中污染物用於評價是否符合本衛生標準的規定。在收集浸泡水的同時，全部換入新的浸泡水。

1.3.3.2 制備空白對照時，除玻璃片上不塗防護材料外，其他一切試驗條件同1.3.3.1.

1.3.4 浸泡水收集和保存：按GB5750－85《生活飲用水標准檢驗法》

2.檢驗方法：

2.1 甲醛按GB5009.69－85《食品罐頭內壁環氧酚塗料衛生標准分析方法》游離甲醛測定。

2.2 乙醛、丙烯醛按GB1193489《水源水中乙醛、丙烯醛衛生標准檢驗方法氣相色譜法》。

3.其他的方法按GB5750－85《生活飲用水標准檢驗法》。

附件B飲用水輸配水設備及防護材料的衛生毒理學評價程序和方法

1.適用范圍

本程序和方法適用於飲用水輸配水設備（包括一切與飲用水接觸的設備）和防護材料的衛生毒理學評價。當飲用水輸配水設備和防護材料在水中的溶出物質未規定最大容許濃度時，需按本方法進行毒理學試驗確定其在飲用水中的限值。

2.總要求

2.1 生產者必須提供以下資料：

2.1.1 產品應用條件、應用范圍、理化性質；

2.1.2 配方、生產方法；

2.1.3 配方各成分的化學結構式、雜質成分和含量；

2.1.4 在飲用水浸泡過程中可能溶出的物質及估計濃度。

2.2 生產者必須根據實際應用情況制備試樣和提供試驗樣品。

3.毒理學評價程序

根據飲用水輸配水設備和防護材料在水中的溶出物質的濃度，分四個水平進行毒理學試驗，以確定其在水中的最大容許濃度。

3.1 水平I：當溶出物質在水中的濃度＜10μg／L時選用。

3.1.1 試驗項目：兩項遺傳毒理學試驗

3.1.1.1 基因突變試驗：Ames試驗

3.1.1.2 哺乳動物細胞染色體畸變試驗：體外哺乳動物細胞染色體畸變或小鼠骨髓細胞染色體畸變試驗，或小鼠骨髓細胞微核試驗任選一項。

3.1.2 結果評價

3.1.2.1 如果上述兩項試驗均為陰性，則可以投入使用。

3.1.2.2 如果上述兩項試驗均為陽性，則該產品不能投入使用或者進行慢性試驗以便進一步評價。

3.1.2.3 如果上述兩項試驗中有一項為陽性，則需選用另外兩項遺傳毒理學試驗作為補充，包括一種基因突變試驗和一種哺乳動物細胞染色體畸變試驗。如果均為陰性，則產品可投入使用，如有一項為陽性，則不能投入使用，或者進行慢性試驗，以便進一步評價。

3.2 水平Ⅱ：當溶出物質在水中濃度等於或大於10μg／L～小於50μg／L時選用。

3.2.1 試驗項目

3.2.1.1 水平Ⅰ試驗。

3.2.1.2 大鼠90天經口毒性試驗。

3.2.2 結果評價

3.2.2.1 對遺傳毒理學試驗結果的評價同水平Ⅰ。

3.2.2.2 通過大鼠90天經口毒性試驗，確定溶出物質在水中的最高容許濃度（安全系數一般選用1000）。

3.2.2.3 當溶出物質在水中的實際濃度超過最大容許濃度時，不能投入使用。

3.3 水平Ⅲ：當溶出物質在水中濃度等於或大於50μg／L～小於1000μg／L時選用。

3.3.1 試驗項目

3.3.1.1 水平Ⅱ試驗。

3.3.1.2 大鼠致畸試驗。

3.3.2 結果評價

3.3.2.1 對遺傳毒理學試驗結果評價水平同水平Ⅰ。

3.3.2.2 當致畸試驗結果為陽性時該產品不能使用。

3.3.2.3 綜合全部試驗結果，確定溶出物質在水中的最大容許濃度。

3.3.2.4 當溶出物質在水中的實際濃度超過最大容許濃度時，不能投入使用。

3.4 水平Ⅳ：當溶出物質水中濃度＞1000μg／L時選用。

3.4.1 試驗項目

3.4.1.1 水平Ⅲ試驗。

3.4.1.2 大鼠慢性毒性試驗。

3.4.2 結果評價

3.4.2.1 當致畸試驗結果為陽性時，不能投入使用。

3.4.2.2 當致癌試驗和遺傳毒理學試驗結果綜合評價，溶出物質有致癌性時，不能投入使用。

3.4.2.3 根據慢性試驗結果確定溶出物質在水中的最大容許濃度。

3.4.2.4 當溶出物質在水中的實際濃度超過最大容許濃度時，不能投入使用。

4.試驗方法：見GB7919－87《化妝品安全性評價程序和方法》

附件2：飲用水化學處理劑衛生安全評價規定

1.范圍

本規定規定了飲用水化學處理劑的衛生安全性要求和監測檢驗方法。

本規定適用於混凝、絮凝、消毒、氧化、pH調節、軟化、滅藻、除氟、氟化等用途的飲用水化學處理劑。

3、致突變作用的檢驗方法

確定一種受試物是否具有致突變作用，須通過致突變試驗，常用的致突變試驗有以下幾種：
染色體畸變分析是經典的遺傳學試驗方法，多用動物骨髓細胞和睾丸精原細胞進行試驗，可分別檢查體細胞和生殖細胞的突變，結果正確可靠，但試驗工作量較大。用外周血細胞經短期體外培養進行染色體分析，可以直接應用於人體，並可在人體或動物連續進行多次動態觀察。骨髓細胞微核檢驗，可以反映染色體經致突變物作用發生斷裂後出現的微核。由於微核易於辨認，故適用於致突變物的初步篩檢。其缺點為個體差異較大，且不夠靈敏。姊妹染色體單體互換分析，是在致突變物作用下組成一條染色體的兩個染色單體之間發生部分的互換，其出現頻率與染色體畸變率呈相關關系，操作簡便,反映亦較靈敏,近年來應用較多。
基因突變試驗可用微生物或哺乳動物細胞株進行。一般多將突變型微生物或哺乳動物突變型細胞株接觸受試物後,檢查其再次發生突變的情況。使用較為廣泛的是艾姆斯試驗。系利用突變型鼠傷寒沙門氏菌株（TA1535、TA1537、TA1538、TA98和 TA100五種）並加入哺乳動物肝微粒體進行體外試驗。這些菌株反應靈敏，可檢出用其他方法不能檢出的低劑量致突變物；且方法簡便快速，費用亦較低，故得到廣泛應用。但微生物的遺傳信息僅相當哺乳動物的1/6，數量較少,結構亦較簡單；哺乳動物具有較微生物完善復雜的DNA修復系統,遺傳物質突變後較易修復（見環境污染與DNA修復）;微生物缺乏免疫機能，哺乳動物則具有較發達的免疫功能，故艾姆斯試驗結果與哺乳動物體內實際情況，可能有一定差別。但艾姆斯試驗靈敏度高，可在48小時迅速得出結果，費用較低,仍不失為一種較好的初篩方法。上述各種方法,都具有一定的局限性，故在實際工作中，通常都採用兩種或兩種以上的方法，以便進行綜合分析和比較。

4、有一種葯叫萌動激活？

是一種醫學理論，萌動激活赤靈芝孢子粉用於治療腫瘤，經臨床試驗專表明，靈芝孢子所含脂質屬活性物質具有顯著的抑瘤作用．可能不治療心臟，肝病，腎病．國內商品名為"學者靈芝」北京地區有售。它是一種保健食品，能顯著提高人體免疫力，迅速激發神經系統產生應急調節反應，疏導及恢復營養組織通道，修復損傷組織和促進細胞再生，對抑制腫瘤及腫瘤組織端粒酶活性和乙肝病毒具有顯著的作用

5、食品毒理學評價評價程序中規定,需進行四個階段毒理學實驗項目的化學毒物是什麼

第一階段：急性毒性試驗：它是一次性投較大劑量後觀察動物的變化，觀察期大約為1周，從而判定動物的致死量（LD）和半致死量（LD50）。半致死量是指實驗動物死亡一半的投葯量。如果投葯量大於5000mg/kg，無死亡，可認為該品毒性較低，無需做致死量精確測定。
第二階段：遺傳毒性試驗，30 天喂養試驗，傳統致畸試驗
遺傳毒性試驗的組合應該考慮原核細胞與真核細胞、體內試驗與體外試驗相結合的原則。從Ames 試驗或V79/HGPRT 基因突變試驗、骨髓細胞微核試驗或哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗、TK 基因突變試驗或小鼠精子畸形分析（或睾丸染色體畸變分析試驗）中分別各選一項。
①基因突變試驗：鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶試驗（Ames 試驗）為首選，其次考慮選用V79/HGPRT 基因突變試驗，必要時可另選其它試驗。
②骨髓細胞微核試驗或哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗。
③TK 基因突變試驗。
④ 小鼠精子畸形分析或睾丸染色體畸變分析。
⑤ 其它備選遺傳毒性試驗：顯性致死試驗、果蠅伴性隱性致死試驗，非程序性DNA合成試驗。
⑥30 天喂養試驗。
⑦ 傳統致畸試驗。
第三階段：亞慢性毒性實驗：實驗期在3個月左右，檢驗該品的毒性對機體的重要器官或生理功能的影響包括繁殖和致畸實驗
第四階段：慢性毒性實驗：考查少量該品長期對機體的影響，確定最大無作用量（MNL），一般以壽命較短敏感的動物的一生為一個試驗階段，如用大白鼠試驗2年小白鼠試驗1.5年。
國際上常用ADI、LD50作為主要毒性安全性指標為，其中，ADI值（Acceptable Daily Intake）也就是每天每千克體重允許攝入的毫克數，聯合國FAO/WHO所屬的食品添加劑專家聯合委員會（JECFA）每年依據各國所用食品添加劑的毒性報告提出，由聯合國食品添加劑法規委員會（CCFA）每年年會討論，並對某種食品添加劑的ADI做出評價、修改或撤銷各國對此都已接受。大家知道，ADI值是根據對小動物（大鼠、小鼠等）近乎一生的長期毒性試驗中所求得的最大無作用量（MNL）,取其1/100-1/500作為ADI值。各國依據ADI值制定出允許在食品中的最大添加量，就食品安全性方面來看，應該說是有保證的。

1） 幾種常見的食品添加劑的ADI值見表1
表1
品名 ADImg/kg 最大使用量g/kg 用途
六偏磷酸鈉 0-70 5.0 方便麵
三聚磷酸鈉 0-70 5.0 方便麵
磷酸二氫鈣 0-70 4.0 麵包,饅頭,餅干
磷酸氫鈣 0-70 1.0 發酵製品,嬰兒食品
過氧化苯甲醯 0-40 0.06 麵粉熟化,增白
硬酯醯乳酸鈣(CSL) 0-20 2.0 麵包糕點
硬酯醯乳酸鈉(SSL) 0-20 2.0 麵包糕點
苯甲酸 0-5 0.2-1 食品防腐
山梨酸 0-25 0.2-2 食品防腐
乳酸亞鐵 0-0.8 0.2-0.5 豆奶粉,豆粉
丁基羥基茴香醚(BHA)0-0.5 0.1-0.2 食用油脂,油炸食品,餅干,方便麵,速煮米
二丁羥基甲苯(BHT) 0-0.3 0.2 早餐谷類食品

註：食品添加劑在食品中的最大使用量一般是依據JECFA推薦的"丹麥預演算法(DBM)"來推算的,這種方法目前已被世界各國公認和採用,即:食品添加劑的最大使用量=40×ADI

2） 半數致死量(LD50)
LD50是判斷食品添加劑安全性的第二種常用指標,也是任何食品添加劑都必須進行的毒理學評價中的第一個階段急性毒性試驗指標，它一般表明了食品添加劑急性毒性的大小。我國《食品安全性毒理學評價程序和方法》(GB 15193.3-2003)頒布的急性毒性（LD50）劑量分級標准表中將用於食品中化學物質依據LD50分成六大類,如表2
表2
毒性級別大鼠口服LD50mg/kg相當於人的致死劑量mg/kg相當於人的致死劑量g/人
極 毒 <1 稍嘗 0.05
劇 毒 1—50 500—4000 0.5
中等毒 51—500 4000—30000 5
低 毒 501—5000 30000—250000 50
實際無毒 5001—15000 250000—500000 500
無 毒 >15000 >500000 2500

一般來講,對動物毒性很低的物質,對人體的毒性也很低，LD50越大表明其毒性越小,在食品使用時其安全性越高,表3是幾種常見的食品添加劑的LD50。
表3
品名 LD50 mg/kg GB2760規定最大使用量g/kg 主要用途
過氧化苯甲醯 7710 0.06 麵粉處理劑
苯甲酸 2530 0.2-0.8 食品防腐劑
丁基羥基茴香醚(BHA) 2000-5000 0.2 抗氧化劑
二丁羥基甲苯(BHT) 890 0.2 抗氧化劑
亞硝酸鈉 220 0.15殘留0.05 肉製品著色劑
亞硝酸鉀 200 0.15殘留0.05 肉製品著色劑
通過表3可以看出,過氧化苯甲醯屬於實際無毒類,苯甲酸屬於低毒類,而肉製品常用的亞硝酸鈉和亞硝酸鉀以及早餐谷類所添加的營養強化劑氧化鋅,都屬於中毒類。

6、氯化鋰能不能毒死人?

氯化鋰對小鼠體細胞遺傳毒性作用的實驗研究 鋰鹽廣泛用於電池、化工、陶瓷製造業及冶金、國防等尖端工業，直接接觸鋰的工人不斷增多，隨之而產生的職業危害問題也日益增加；因鋰鹽具抗躁狂症的治療作用而又被廣泛應用於臨床〔1〕。全世界每年用鋰可達25 000噸。據WHO統計資料顯示：全世界至少有5億人患有各種心理精神障礙，佔世界人口的10%。由於鋰鹽治療劑量和中毒劑量的安全幅度小，常出現各種毒性作用且精神疾患的療程長，故研究其長期慢性接觸的危害，對其安全用葯提供科學依據是很有必要的。目前，國內除伊龍贊進行過鋰對小鼠骨髓微核率影響外，還未見其他有關鋰鹽對小鼠遺傳毒性的報道，故本研究擬在本實驗室對氯化鋰生殖發育和免疫毒性及致畸試驗的基礎上觀察氯化鋰對昆明種小鼠不同組織體細胞的遺傳毒性。 1 材料與方法 1.1 材料 1.1.1 實驗動物 新疆醫學實驗動物中心提供健康昆明種小鼠18～25 g，25～30 g。 1.1.2 實驗主要試劑 氯化鋰：LiCl。H2O，分子量60.41，分析純，上海試劑二廠提供。環磷醯胺(CP)：上海第十二制葯廠提供。秋水醯鹼：C22H25O6N,分子量399.43，昆明制葯廠出品。 1.2 方法及觀察指標 1.2.1 小鼠骨髓細胞染色體畸變試驗 選健康性成熟昆明種小白鼠18～25 g，40隻，雌雄各半，隨機分為5組，3個染毒組及陰性和陽性對照組。劑量選擇依據本實驗室得LD50選定高劑量組為1/8 LD50，中劑量組為1/24高劑量組，低劑量組為1/80高劑量組，即各組劑量分別為：225，75，22.5 mg/kg氯化鋰溶液，陰性對照組給予蒸餾水。連續灌胃染毒5天，每日1次，每日按體重調整灌胃量，陽性對照組於處死動物前1天給予腹腔注射CP40 mg/kg，各組動物均於處死前2～3小時腹腔注射秋水醯鹼4 mg/kg，於末次染毒6小時後處死動物，取雙側股骨骨髓按常規程序製片，觀察骨髓細胞染色體畸變率。 1.2.2 小鼠骨髓細胞微核試驗 選健康性成熟昆明種小白鼠18～25 g，50隻，雌雄各半，分組及各組染毒劑量同上。末次染毒24小時後處死小鼠取雙側股骨骨髓，按常規塗片，觀察骨髓嗜多染紅細胞微核率。 1.2.3 小鼠胎肝細胞微核試驗 選健康性成熟昆明種小鼠25～30 g，按雌雄2∶1合籠，查到陰栓之日，記為受孕第0天，將孕鼠50隻隨機分為5組，分組與染毒劑量同上。在妊娠第14天1次給予灌胃染毒，在染毒後12～18小時處死小鼠，每窩至少取兩只胎肝，按文獻方法製片〔2〕，觀察胎肝嗜多染紅細胞微核率。 1.2.4 統計方法 採用PEMS軟體包，用方差分析及兩兩比較的q檢驗、秩和檢驗進行資料的統計分析。 討論 3.1 氯化鋰對小鼠骨髓細胞染色體畸變率的影響 關於鋰對骨髓細胞染色體畸變率的影響，國外曾有學者進行過報道，Bille等在1975年研究接受鋰鹽治療病人後未發現骨髓細胞染色體出現任何染色體畸變〔3〕。Sobti研究了3種鋰鹽：氯化鋰、碳酸鋰、醋酸鋰導致對小鼠骨髓細胞染色體畸變的情況，其結果顯示這3種鋰鹽對小鼠染色體具有損傷作用，本次試驗結果與其相一致，許多化合物誘發的基因突變與染色體畸變高度相關，有研究表明：鋰可選擇性地與DNA結合，也可以與Mg2+競爭而減弱DNA的合成和修復，從而誘發染色體畸變〔4〕。本次試驗結果畸變類型以裂隙、斷裂、環為最。其中斷裂環為染色體型畸變，屬「不穩定」畸變，常導致細胞的死亡，裂隙若可確定為染色單體型畸變，則其引起的損傷若經錯誤修復就易致遺傳損害，可作為一個敏感的遺傳毒理學的參數。本實驗結果表明，225.0 mg/kg劑量的氯化鋰對小鼠骨髓細胞具有遺傳毒性作用。 3.2 氯化鋰對小鼠骨髓細胞微核率的影響 檢測哺乳動物骨髓細胞微核率是測定誘發染色體損傷的常用致突變短期檢測方法之一，微核是細胞因受損在有絲分裂後期仍留在細胞質內的喪失著絲點的染色體斷片或染色單體斷片。本次實驗結果表明，225.0 mg/kg劑量的氯化鋰可以引起小鼠骨髓細胞染色體的斷裂損傷。 3.3 氯化鋰對小鼠胎肝微核率的影響 實驗證明，許多化學物對胎鼠肝細胞染色體損傷的程度大大超過對母鼠骨髓細胞染色體的損傷作用。所以僅用成年動物的體內試驗不一定能可靠地預測胚胎期接觸遺傳性毒物對胎兒造成的危害，並且動物整個一生中供給新生細胞的幹細胞都是在胚胎發育期形成。因此，胚胎期間的染色體損傷可使出生後的子代對腫瘤和其他疾病的敏感性增強，胚胎期間受誘變劑的作用，還可使新生兒畸形率升高。因此，評價化學物質的潛在性遺傳危害時，對胎兒的影響必須給以足夠的重視。因為哺乳動物在妊娠期胎盤的新陳代謝活躍，增加了母體對誘變物的敏感性。幼稚的胚細胞分裂旺盛，對誘變物也相當敏感。一些前誘變物和前致癌物在肝內代謝、活化，導致肝內誘變因子的濃度增高。所以胎兒細胞的染色體在某些毒物的作用下發生斷裂，使微核出現增高。因此，胚胎細胞微核試驗可用來檢測在骨髓微核試驗中不敏感的前誘變物和前致癌劑並篩選能通過胎盤屏障而傳給子代以及易在胎兒體內積蓄的化學誘變劑。我們在測胎鼠胎肝嗜多染紅細胞微核率的同時，對母體骨髓細胞微核率進行了觀察，實驗結果表明，氯化鋰對胎鼠具有明顯的遺傳毒性作用。同時比較相同劑量下的骨髓細胞微核率與胎肝細胞微核率，表明母體骨髓細胞對染色體斷裂劑不如胎鼠肝嗜多染紅細胞敏感。 綜合上述試驗結果可認為：氯化鋰灌胃染毒對昆明種小鼠體細胞具有遺傳毒性作用，其對胎鼠體細胞的遺傳毒性作用更為明顯，有必要進一步研究氯化鋰對小鼠生殖細胞的遺傳毒性作用。

7、三項遺傳毒性試驗是指代哪三項

通常是在嚙齒類動物試驗中評估致癌性風險，包括周期為2年的試驗或採用替代模型而周期較短的試驗。通過ICH程序，企業和管理者接受了遺傳毒性核心組合試驗方案。這些試驗是用於確定化合物的遺傳毒性，包括：
■一項細菌基因突變試驗
■一項採用哺乳動物細胞進行的體外染色體損傷評估試驗，或體外小鼠淋巴瘤tk+/-試驗
■一項採用嚙齒類動物造血細胞進行的體內染色體損傷試驗。
如果ICH推薦的標准三項試驗組合中任何一項結果為陽性，建議完成ICH試驗組合中的第四項試驗。若結果模稜兩可時需重復試驗以確定結果的可重現性。如果一項或多項試驗結果為陽性，申辦人應考慮以下選擇中一項或更多項。

A.證據權衡法（Weight-of-evidenceapproach）
在某些情況下，在對所有現有資料進行評估後，證據權衡提示無遺傳毒性危害。例如，在體外細胞遺傳學試驗的一種暴露方案下出現了陽性反應，這個陽性結果僅在高劑量時出現，而發生率升高的程度在所用溶劑和細胞系的歷史對照數據范圍內或剛剛超出該范圍。證據權衡後可能提示，雖然染色體異常頻率的輕微升高有統計學意義，但無生物學相關性。有幫助的考慮因素包括（1）在出現陽性結果的劑量時細胞毒性的水平，（2）相同試驗或補充試驗的確證性數據。例如，在無代謝活化下短期暴露時出現陽性結果，但在相當細胞毒性水平的長期暴露中未得到確證，這時陽性結果可能不具有生物學意義。相似地，在體外染色體異常試驗得到陽性結果，而在相當暴露方案下小鼠淋巴瘤試驗未得到確證，也可對該陽性結果的意義產生疑問。如果證據權衡法提示無遺傳毒性危害，可進行重復給葯的臨床試驗，該陽性結果應寫入研究者手冊和知情同意書。
B.作用機制
有些情況下作用機制的相關信息可以滿意地解釋陽性結果出現的原因。例如，資料顯示，過高的克分子滲透壓濃度或較低的pH可導致體外誘裂作用。在這種非生理性暴露條件下出現的陽性反應與人體風險無相關性。此外，一些遺傳毒性反應被認為產生風險存在閾值。有些葯物通過非直接機制產生影響，例如干擾核苷及其前體的代謝、損傷紡錘體蛋白、抑制DNA合成或抑制拓撲異構酶，這些葯物的遺傳毒性可能具有閾值。在這種情況下，我們建議提供閾值存在的證據，而該閾值在擬進行的臨床暴露過程中可能達不到，或者存在的機制證據在體內預期是無效的。如果陽性反應能被MOA合理解釋時，可能會允許在正常志願者或病人上進行臨床試驗而不需要附加試驗。

C.附加的支持性試驗
有些情況下，體外試驗的結果顯示出了可重復性的陽性的劑量反應關系。骨髓細胞遺傳學試驗的結果經常為陰性，即使是體外遺傳毒性試驗結果為陽性的葯物。這種差異可能來源於培養細胞和整體動物間的多種差異：體外和體內不同的代謝途徑，整體動物的代謝滅活作用，母體化合物或活性代謝產物不能到達靶細胞，或者很簡單，體內血漿葯物濃度不能達到在體外試驗中產生陽性反應的葯物濃度。
對於確證體外試驗的陽性結果，附加的體內試驗可能很有用。例如，小鼠重復給葯毒性試驗中進行外周血塗片，可以用來評估誘導微核的作用，大鼠或猴重復給葯毒性試驗進行外周血淋巴細胞培養，可用於評估細胞分裂中期的染色體損傷。在潛在的靶組織中應評估DNA損傷（如通過彗星或鹼基洗脫試驗來評估DNA加合物或DNA鏈斷裂），或用轉基因大鼠或小鼠來評估在可能的靶組織中的誘變性。
當體外遺傳毒性試驗結果為陽性時，敘利亞倉鼠胚胎細胞（Syrianhamsterembryo，SHE）轉化試驗可用作附加試驗。文獻資料顯示，通常化學物質的SHE試驗與嚙齒類動物致癌性試驗結果具有良好的相關性(Isfortetal.1996)。國際生命科學會（，ILSI)對人用葯物進行確證性研究，雖然是較小范圍進行，但結果提示SHE試驗對人體致癌性風險的預測能力較差(Mautheetal.2001)。對於人用葯物，ILSI研究發現SHE對於檢測人類致癌性具有高敏感性（83%）；但是，對於假定的人體非致癌劑（putativehumannoncarcinogens）預測的特異性較低（15%），這導致總體一致性僅為37%。雖然，轉化試驗檢測的終點與所擔憂的健康影響（癌症）更為接近，可能在進行證據權衡判斷時有用，他們也有其固有的局限性。在兩年嚙齒類致癌性試驗中表現出陽性結果的很多葯物，是通過擴大的葯理學作用、免疫抑制或激素失衡出現的。體外試驗如何能反映出這些機制尚不明確。
在最近幾年中，已經有一些轉基因小鼠可以在短期致癌性試驗中應用。研究顯示p53單一缺陷小鼠在致突變性致癌劑的鑒定方面有用(MacDonaldetal.2004)。當p53致癌性試驗結果陰性時，可認為一種遺傳毒性葯物不會通過p53介導的機制對人類產生致癌性危害。
一個葯物的一項ICH指定的試驗結果為陽性時，支持性試驗有助於證據權衡，以判斷是否可為參加臨床試驗的受試者帶來產生遺傳損傷的風險。確定是否需進行潛在致瘤性的早期評價，可能是必要的，這將基於在具體情況具體分析基礎上。影響這個決定的因素包括目標人群、適應症、暴露時間、同系的其他葯物或相同用途的其他葯物的安全特性。

8、化學品毒性鑒定技術規范的鑒定程序和方法

化學品毒性鑒定分為4個階段
（1）第一階段（急性毒性試驗、眼刺激試驗和皮膚刺激試驗）
主要是急性毒性參數的測定和了解受試樣品對皮膚、粘膜的刺激性以及致敏性，為毒性分級和標簽管理提供依據。同時，可了解受試樣品對機體造成急性損害的可能性和嚴重程度，並為第二階段各項試驗的劑量設計提供依據。在測定LD50時，一般要求用兩種動物，染毒途徑應包括所有人體可能的接觸途徑。
· 急性吸入毒性試驗
· 急性經皮毒性試驗
· 急性經口毒性試驗
· 急性眼刺激性/腐蝕性試驗
· 皮膚刺激性/腐蝕性試驗
· 皮膚變態反應試驗（皮膚致敏試驗）
（2）第二階段（亞急性毒性試驗和致突變試驗）
主要是了解受試樣品的亞急性毒性和遺傳毒性，為第三階段各項試驗劑量設計和觀察指標的選擇提供依據，並對受試樣品的致癌性進行預測。
· 鼠傷寒沙門氏菌回復突變試驗（Ames試驗）
· 體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗
· 體內哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗
· 體內哺乳動物骨髓嗜多染紅細胞微核試驗
· 哺乳動物精原細胞/初級精母細胞染色體畸變試驗，或
· 精子畸形試驗
· 嚙齒類動物顯性致死試驗
· 免疫毒性評價試驗方法
· 亞急性吸入（14/28天）毒性試驗
· 亞急性經皮（21/28天）毒性試驗
· 亞急性經口（28天）毒性試驗
（3）第三階段（亞慢性毒性試驗、致畸試驗、繁殖試驗）
通過亞慢性試驗進一步確定多次重復染毒的毒作用性質和靶器官，初步確定NOAEL或LOAEL，為第四階段各項試驗的劑量設計和觀察指標的選擇提供依據；通過致畸試驗判斷受試樣品的胚胎毒性及其是否有致畸性。通過繁殖試驗，可判斷受試樣品對生殖過程的損害作用。通過遲發性神經毒性試驗，可判斷受試樣品是否具有遲發性神經毒作用。
· 亞慢性吸入毒性試驗
· 亞慢性經皮毒性試驗
· 亞慢性經口毒性試驗
· 致畸試驗
· 兩代繁殖毒性試驗
· 遲發性神經毒性試驗
（4）第四階段（慢性毒性試驗和致癌試驗）
通過慢性毒性試驗可確定受試樣品的NOAEL和LOAEL，為推算受試樣品的安全接觸限值提供依據。通過致癌試驗可以確定受試樣品對受試實驗動物的致癌性。通過代謝動力學試驗可以了解受試樣品的吸收、分布、代謝和排泄特點，了解蓄積毒性作用及其可能的靶器官和毒作用機理。
· 慢性吸入毒性試驗
· 慢性經皮毒性試驗
· 慢性經口毒性試驗
· 致癌試驗或慢性毒性試驗合並致癌試驗
· 毒物代謝動力學試驗
參考方法
· 皮膚變態反應試驗-局部淋巴結法
· 大腸桿菌回復突變試驗
· 酵母菌基因突變試驗
· 體外哺乳動物細胞正向基因突變試驗
· 果蠅伴性隱性致死試驗
· 枯草桿菌基因重組試驗
· 體外哺乳動物細胞程序外DNA合成（UDS）試驗
· 體內哺乳動物外周血細胞微核試驗
· 體外哺乳動物姊妹染色單體交換（SCE）試驗
· 體內哺乳動物骨髓細胞姊妹染色體交換（SCE）試驗
· 繁殖/生長發育毒性篩選試驗
· 亞急性毒性合並繁殖/發育毒性篩選試驗
· 一代繁殖試驗
· 神經毒性篩選組合試驗

9、吉林大學衛生檢測中心的毒理學檢測

1
急性毒性試驗
《化學葯品和治療用生物製品研究指導原則（試行）》（國家葯品監督管理局2002年版）
《化妝品衛生規范》（衛生部2002年版）《農葯登記毒理學試驗方法》(GB15670-1995)
《保健食品檢驗與評價技術規范》(衛生部2003年版)
《食品安全性毒理學評價程序和方法》（GB15193-2003）
2
長期毒性試驗（慢性毒性試驗）
3
致畸試驗
4
鼠傷寒沙門氏菌營養缺陷型回復試驗（Ames試驗）
5
微核試驗（嚙齒動物、動物骨髓嗜多染細胞、骨髓細胞）
6
急性眼刺激
《化學葯品和治療用生物製品研究指導原則（試行）》（國家葯品監督管理局2002年版）《化妝品衛生規范》（衛生部2002年版）《農葯登記毒理學試驗方法》(GB15670-1995)
7
急性皮膚刺激試驗
8
哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗
《農葯登記毒理學試驗方法》(GB15670-1995)《化妝品衛生規范》（衛生部2002年版）《保健食品檢驗與評價技術規范》(衛生部2003年版)《食品安全性毒理學評價程序和方法》（GB15193-2003）
9
皮膚變態反應試驗
《化妝品衛生規范》（衛生部2002年版）《農葯登記毒理學試驗方法》(GB15670-1995)
10
小鼠精子畸形試驗
《化妝品衛生規范》（衛生部2002年版）《保健食品檢驗與評價技術規范》(衛生部2003年版)《食品安全性毒理學評價程序和方法》（GB15193-2003）
11
體外培養哺乳動物細胞染色體畸變試驗
《化妝品衛生規范》（衛生部2002年版）《化學葯品和治療用生物製品研究指導原則（試行）》 （國家葯品監督管理局2002年版）
12
繁殖試驗
《農葯登記毒理學試驗方法》(GB15670-1995)《食品安全性毒理學評價程序和方法》（GB15193-2003）《保健食品檢驗與評價技術規范》(衛生部2003年版)
13
小鼠睾丸染色體畸形試驗
《保健食品檢驗與評價技術規范》(衛生部2003年版)《食品安全性毒理學評價程序和方法》（GB15193-2003）
14
非程序性DNA合成試驗