如何取骨髓細胞

1、捐獻骨髓時是怎樣抽取的

朋友，詳細介紹給你了， 1．骨髓是人體的造血組織，位於人體許多骨骼內．成年人的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓．紅骨髓能製造紅細胞、血小板和各種白細胞．血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，抱括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能製造抗體。因此，骨髓不但是制血器官，它還是重要的免疫器官。黃骨髓主要是脂肪組織，當人體貧血時，它可以轉化為紅骨髓。 2．捐獻骨髓會不會影響捐獻者的身體健康？ 捐款骨髓不會影響人的健康。許多人認為捐獻骨髓是抽取脊髓，這完全是一種誤解。骨髓移植是需要人體內的紅骨髓——造血幹細胞。一個成年人的造血幹細胞是3公斤，一名捐獻者提拱不到10克的骨髓幹細胞就能救活一名白血患者、因此不會減盡弱其免疫能力和造血能力。骨髓是在生能力很強的組織，對於健康捐獻者，會在10天左右即可補足所捐獻的幹細胞量。 3．健康者在什麼年齡段適合捐獻骨髓？ 健康者在18～55歲均可捐獻骨髓。 4．什麼是骨髓移植？ 骨髓移植是指把骨髓中的造血幹細胞從一個人體內移植到另一個人體內（一般是通過靜脈輸入）。確切地說，骨髓移植就是造血幹細胞的移植。 5．什麼人需要進行骨髓移植？ 人體血液系統及免疫系統的嚴重疾病，如白血病（俗稱血癌）。淋巴瘤、再生障礙性貧血地中海貧血、重病放射病患者，繼續生存的希望就是骨髓移植。我國每年約400萬名各類疾病的患者等待著骨髓移植。 除了對捐獻者的休重、血壓等身體健康程度和獻血條件一樣外，捐獻骨髓者一般要求在18周歲以上、45周歲以下，最好有獻血或捐獻血小板的經歷，一旦抽樣，配對也要求是身體、心理等都較成熟者，以便於救治患者，從嚴格意義上來說，捐髓實際上是捐獻造血幹細胞，一次性捐獻量約20克左右，對身體沒有影響，市民可在義務獻血的同時填寫一張自願捐髓表，這樣醫院將有關資料輸入信息庫後，可隨時約請志願者救死扶傷。 樣捐獻骨髓 1.如何成為志願捐獻者？ 如果您年齡在18至55歲之間、身體健康，可撥打中華骨髓庫骨髓捐獻熱線電話：（北京）010－65126600，（上海）021－62478117，或到區縣級以上紅十字會報名，並填寫志願捐獻書及有關表格。 2.捐獻骨髓有哪些步驟？ 1）報名後，骨髓庫或紅十字會安排您驗血5毫升，並將化驗的HLA分型結果儲存在中國造血幹細胞捐獻者資料庫中，供患者尋找配對。 2）供者與受者初步配型相同，骨髓庫的工作人員會向您詳細介紹捐獻過程，同時請您接受全身檢查。 3.如何抽取骨髓？ 抽取骨髓造血幹細胞有兩種方法：一是醫生在供者的髂骨部位穿刺採集骨髓中的造血幹細胞，術後一兩天內有些疼痛，一周內就可完全恢復。二是用科學的方法有效地動員骨髓和其他部位的造血幹細胞大量釋放到外周血液中去，從供者的手臂靜脈中採集，並通過機器將造血幹細胞分離出來，剩餘的血液回輸到供者體內。 4.捐獻骨髓會不會影響身體健康？ 許多人認為捐獻骨髓是抽取脊髓，這完全是一種誤解。骨髓移植需要的是人體內的紅骨髓——造血幹細胞。一個成年人的骨髓重量為3公斤，一名供髓者提供不足10克的骨髓造血幹細胞就能挽救一名白血病患者的生命。骨髓是再生能力很強的組織，一般健康者捐獻造血幹細胞後在十天左右即可補足所捐的幹細胞量。因此，捐獻骨髓不會影響人的身體健康。

2、如何提取小鼠骨髓細胞?

1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後，拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨，用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚，用眼科剪小心剪開皮膚，並分離兩下肢的皮膚，往下在腳踝處剪斷，往上在髖關節處剪斷，這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉，分別剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（脛骨）,剪去兩端軟骨，露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔，沖洗骨髓腔以獲得骨髓，一般用2-3ml培養基沖洗兩次，可沖出絕大部分細胞。
5、過濾：用2OO目的濾網過濾，將濾網的中央插入到離心管裡面25px處，然後用注射器吸取骨髓液，慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中，去除殘渣。
6、離心：將離心管放置離心機中離心10分鍾（1350r/min）
7、去上清，加入1ml紅細胞裂解液ACK，靜置3分鍾，再加9ml HBSS溶液，進行離心10分鍾，棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次，室溫，1350r/min離心10分鍾。計數活細胞，用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基，然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇，
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻，24孔板鋪板培養，每個孔1ml.

3、如何抽取骨髓、對人體有危險嗎？

抽取骨髓造血幹細胞有兩種方法：1.用科學的方法有效地動員骨髓和其他部位的造血幹細胞大量釋放到外周血液中去，從供者的手臂靜脈中採集，並通過機器將造血幹細胞分離出來，剩餘的血液回輸到供者體內。捐獻幹細胞既無礙健康，也沒有危險，只需您付出一點勇氣。2.醫生在供者的髂骨部位穿刺採集骨髓中的造血幹細胞，術後一兩天內有些疼痛，一周內就可完全恢復(此法現很少採用)。

4、如何提取造血幹細胞？

傳統方式是:

用骨腔穿刺採集，現在則多通過注射動員劑，把骨腔里的造血幹細胞釋放出來進入血管，通過機器把造血幹細胞從血液中分離出來。

5、骨髓怎麼抽出來？

抽取骨髓造血幹細胞有兩種方法：一是醫生在供者的髂骨部位穿刺採集骨髓中的造血幹細胞，術後一兩天內有些疼痛，一周內就可完全恢復。二是用科學的方法有效地動員骨髓和其他部位的造血幹細胞大量釋放到外周血液中去，從供者的手臂靜脈中採集，並通過機器將造血幹細胞分離出來，剩餘的血液回輸到供者體內。 第一種： 疼 。第二種：不疼(跟獻血一樣) 。

6、如何取骨髓

不是在脊椎取骨髓血的，外國是在骨骼上鑽孔取骨髓血（脊椎裡面是脊髓，沒有骨髓）。我國是利用動員劑（集落刺激因子）將骨髓中的造血幹細胞釋放到外周血，通過外周血分離和採集的，就像採集血小板一樣，只不過採集時間長一點。一點不痛苦，就像獻血一樣

7、骨髓是怎麼採集的

骨髓造血幹細胞是直接從紅骨髓中採集造血幹細胞的方法。紅骨髓是造血幹細胞存在的主要場所。由於抽取骨髓時骨髓腔內的血液亦會同時被抽取出來，為預防捐贈者損失過多紅細胞造成貧血或血壓過低。在捐獻骨髓前需要捐贈者做自體備血：即在捐獻前幾周逐步採集自身血液共600毫升，存儲在體外在手術時輸入。骨髓造血幹細胞採集需要在全身麻醉或硬膜外麻醉行外科手術進行。手術時，在麻醉後穿刺針插入臀部兩側的髂骨內抽取骨髓細胞。隨抽取骨髓細胞需要可能在髂骨的多點穿刺。抽取骨髓的量依患者體重而定，約須抽出500~1000毫升骨髓液。手術同時向體內回輸原自備血，以免貧血發生。骨髓造血幹細胞採集不會切開皮膚，只是在皮膚表面留下數個穿刺針孔。術後，需防止傷口部位出血。傷口部位可能感覺疼痛，可對症處理。大多數捐贈者還會感到腰部有酸痛感。另外，由於麻醉劑的作用，有的捐贈者會有惡心嘔吐感覺。由於體內白細胞計數暫時底下，可能會有輕度發燒的現象。出現這些情況也可由醫生對症進行處理。

雖然是復制的，但......我也用心了。

8、捐獻骨髓是怎樣的過程

骨髓抽取及骨髓幹細胞的分離純化：捐獻者在無菌條件下從髂後上棘進行穿刺，分不同部位抽取骨髓l0～20 mL，置於肝素化的無菌離心管中，骨髓離心取出脂肪層.

捐獻造血幹細胞不會影響身體健康：
不管是骨髓造血幹細胞捐獻還是外周血造血幹細胞捐獻，都不會影響身體健康。許多人認為捐獻骨髓就是抽取骨髓，這完全是一種誤解。骨髓移植需要的是人體內的紅骨髓，即造血幹細胞。
一個成年人的骨髓重量為3公斤，一名供髓者提供不足10克的骨髓造血幹細胞就能挽救一名白血病患者的生命，不會因此減弱其免疫功能和造血功能。
人體內的造血幹細胞具有很強的再生能力。正常情況下，人體各種細胞每天都在不斷新陳代謝，進行著生成、衰老、死亡的循環往復，失血或捐獻造血幹細胞後，可刺激骨髓加速造血，1-2周內，血液中的各種血細胞恢復到原來水平。因此，捐獻造血幹細胞不會影響身體健康。

參考資料：http://engine.cqvip.com/asp/vipsearch.asp?Query=干細跑移植治療研究&Type=L

9、如何取小鼠骨髓細胞

1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠)，放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後，拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨，用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚，用眼科剪小心剪開皮膚，並分離兩下肢的皮膚，往下在腳踝處剪斷，往上在髖關節處剪斷，這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉，分別剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（脛骨）,剪去兩端軟骨，露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器，每支吸取1mlHBSS液，並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔，沖洗骨髓腔以獲得骨髓，一般用2-3ml培養基沖洗兩次，可沖出絕大部分細胞。
5、過濾：用2OO目的濾網過濾，將濾網的中央插入到離心管裡面25px處，然後用注射器吸取骨髓液，慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中，去除殘渣。
6、離心：將離心管放置離心機中離心10分鍾（1350r/min）
7、去上清，加入1ml紅細胞裂解液ACK，靜置3分鍾，再加9ml HBSS溶液，進行離心10分鍾，棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次，室溫，1350r/min離心10分鍾。計數活細胞，用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基，然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇，
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻，24孔板鋪板培養，每個孔1ml.