骨髓片染色方法

1、骨髓細胞染色常用什麼方法，各是用於何種檢測。

骨髓細胞內外鐵染色,是進行貧血分類的常用組織化學染色方法,一般均採用普魯士蘭染色法,該法雖操作簡便,但若掌握不好,常使玻璃上沉積大量污染鐵,無法判定結果,我們曾查閱多種材料,對該項試驗的一些細節問題均無詳細介紹。最近我們參照各家材料,經過多次試驗從玻片處理試劑配製、試驗的時間、溫度、最後漂洗的手法復染時間的控制等步驟上,對細胞內外鐵染色的方法進行探討,摸索出了一套較滿意的染色方法,現介紹如下。

【作者單位】： 黑龍江省寶泉嶺農場醫院
【關鍵詞】： 骨髓細胞 鐵染色 染色方法 組織化學 試劑配製 玻片處理 氰化鉀 貧血分類 普魯士蘭 染色法
【分類號】：R361
【正文快照】：
骨髓細胞內外鐵染色,是進行貧血分類的常用組織化學染色方法。一般均採用普魯士蘭染色法,該法雖操作簡便,但若掌握不好,常使玻璃上沉積大量污染鐵,無法判定結果,我們曾查閱多種材料,對該項試驗的一些細節同題均無詳細介紹。最近我們參照各家材料,經過多次試驗從玻片處理試劑

2、he染色的操作步驟

HE染色步驟： 

1、脫蠟，脫蠟二甲苯Ⅰ、Ⅱ各10分鍾，事先准備好蓋玻片。

2、覆水，100%（Ⅰ、Ⅱ）、90%、80%、70%酒精各5分鍾，自來水沖洗5分鍾×3。

3.、蘇木精染色5分鍾，根據染色情況，可以適當增加或減少染色時間，流水沖洗。 

4、5%乙酸分化1分鍾，流水沖洗，用吸管滴加乙酸，布滿玻片上的組織即可，分化後顏色變淺了一些，成為藍色。

5、返藍：返藍液，實驗室沒有，也可不用。

6、伊紅染色1分鍾，根據染色情況，可以適當增加或減少染色時間，流水沖洗。

7、脫水：70%、80%、90%、100%酒精各10秒，二甲苯1分鍾，可以在通風櫥自然晾乾再封

片，約5分鍾左右。

8、滴上中性樹膠，封片，用吸管滴上一滴即可，盡量少滴，但壓片後要將組織全部覆蓋完，避免中間有氣泡。

(2)骨髓片染色方法擴展資料：

he染色原理：

易於被鹼性或酸性染料著色的性質稱為嗜鹼性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia )；而對鹼性染料和酸性染料親和力都比較弱的現象稱為中性（neutrophilia)。

構成組織內蛋白質的氨基酸的種類很多，它們有不同的等電點。在普通染色法中，染色液的酸鹼度為pH6左右，細胞內的酸性物質如細胞核的染色質、腺細胞和神經細胞內的粗面內質網及透明軟骨基質等均被鹼性染料染色，這些物質稱為嗜鹼性。

而細胞質中的其它蛋白質如紅細胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色，這些物質稱為嗜酸型。如果改變染色液的酸鹼度，pH值升高時，則原來被酸性染料染色的物質可變為嗜鹼性；pH值降低時，原來被鹼性染料染色的物質則可變為嗜酸性。

所以說染色液的pH值可以影響染色的反應。脫氧核糖核酸（DNA）兩條鏈上的磷酸基向外，帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精鹼性染料以離子鍵結合而被染色。蘇木精在鹼性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。

3、血塗片染色檢查原蟲的方法和步驟

方法和步驟如下：
一、玻片清潔
玻片清潔。清潔的玻片無油脂，無劃痕，無灰塵，玻片
上有油跡，使厚血膜容易脫落，薄血膜塗布不均勻。在用手
指持玻片時，只能夾持玻片的兩側邊緣，不要接觸玻片的表
面以避免手指上的油污染污玻片。
1.新的載玻片先用熱肥皂水洗滌，再用清水沖洗，然後
用軟而潔凈的毛巾擦乾待用。
2.使用過的載玻片的清潔方法有兩種：
①5%的肥皂水煮沸法
將洗衣肥皂削成小片，加水配成約5%的肥皂 水，煮沸
後將玻片一張一張地平放進肥皂水內，微火煮約一刻鍾，然
後滅火待肥皂水稍冷後，用清潔干毛巾擦凈後待用。
②清潔液浸泡法清潔液配製如下
重鉻酸鉀 80g
濃硫酸 100ml
水(清凈水)1000ml
配製時須先將重鉻酸鉀研細放入水中，慢慢加溫到全部
溶解為止，然後緩緩加入濃硫酸，待溶液冷卻後倒入有蓋的
大口玻璃缸內。清潔玻片時，將待洗的玻片逐張放入清潔中
浸泡一兩天後，取出清水沖洗至完全沒有黃色為止。浸泡前
最好用二甲笨除去鏡油，清潔液顏色變為墨綠色後即失去清
潔作用，不能再用。
二、製片
1.薄血膜塗制
(1)先用75%酒精棉球將耳垂消毒，待酒精幹後用采血針
迅速刺入耳垂近下端邊緣處。
(2)用左手的拇指與食指以及右手的中指向相對的方向
將耳垂輕輕擠壓出血。
(3)取一張潔凈的載玻片，將它的左1/3的表面接觸耳垂
上的血滴不要將玻片接觸耳垂上的皮膚，使一小滴血在
玻片上。血量1-1.5mm
3
.1/4.火柴頭大小。
(4)將推片臵於血溶之前與血液相接觸，待血液沿推片邊
緣展開後，將推片與載玻片保持30角度，用力均勻迅速將
推片由右向左推出而製成薄血膜。塗製得較好的薄血膜只有
一層血球，血球的分布排列比較均勻，血膜的末端突出如舌
狀。
若取的血滴太大，則塗制的血膜太寬太厚，若推時用力
不均勻，則易成梯田狀
若用力太大，則血膜兩端過厚，若塗片上有油污，則血
膜成多孔狀。
2.厚血膜塗制，薄血膜塗好後，再輕擠耳垂擠出約火柴
頭大一血滴，將這一滴血滴在玻片的中心1/3處然後用推片
的一角由血滴中央向周圍旋轉塗成直徑約一厘米的圓形血
膜，旋轉塗制時間不宜過短，以免形成纖維蛋白束，遮蓋了
瘧原蟲。
厚血薄塗好後，應平放待干，防蒼蠅舔食血膜或灰塵落
在上面。受檢者的編號可用鉛筆或鋼筆寫在薄血膜的邊緣
上，也可用蠟筆寫在厚血膜一端。
三、染色
常用的染色方法有姬姆薩氏和瑞氏兩種
(一)吉氏染色法，吉氏染劑是最可靠的血膜染劑其優
點是易於掌握很少染色過度，染好後的血膜褪色較慢
1.吉氏染劑的配製
吉氏染劑粉 0.5g
甘油，中性，25ml
甲醇，純，分析純，25ml
將吉氏染劑粉0.5臵於乳缽中，加少許甘油充分研磨
再加甘油研磨，直至25甘油加完為止。將充分研磨的吉氏
甘油液倒入無水，干凈的棕色玻塞瓶中，然後分次加甲醇於
乳缽洗出染劑倒入瓶中，直至25甲醇將乳缽洗凈並全部倒
入瓶中，塞緊，充分搖勻，放臵室內一星期，每天搖動數次
以後即可使用.
2.緩沖液的配製;
為了保證染色良好，使瘧原蟲的核和胞漿紅蘭分明，感
染的紅血球上的薛氏小點清楚，在稀釋染劑厚液時所用的
蒸餾水必須加緩沖液，緩沖蒸餾水。新鮮蒸餾水可能接近
中性，但貯存在一個時期後，由於吸收了空氣中的 而變為
酸性，因此蒸餾水中必須加緩沖液，使其達到我們需要的效
果。
緩沖液配製
磷酸氫二鈉，無水 9.5g
蒸餾水 1000ml
磷酸二氫鉀 9.07g
蒸餾水 1000ml
將上二液分別貯存於緊塞的玻瓶中。
稀釋染劑所用的蒸餾水的ph以7.0-7.2為最適宜現
用現配可按下表配製緩沖蒸餾水的配製（ml）
ph 磷酸二氫鈉液 磷酸二氫鉀液 蒸餾水
6.6 37 63 900
6.8 49 51 900
7.0 63 37 900
7.2 73 27 900

4、在醫學上,組織切片常用的染色方法是什麼?

蘇木精-伊紅染色，即HE染色。
脂肪可以用鋨染色（以蘇丹3、油紅、鋨酸染色）。
神經用HE或者銀染。

5、急求骨髓塗片鐵染色法技術流程

1)4%的鹽酸溶液.:40ml(38%濃鹽酸)+340ml蒸餾水
2)40g/L亞鐵氰化鉀液
3)鹼性復紅:1g復紅+10ml無水乙醇+90ml(5%石碳酸溶液),用時取3ml加100ML水.
4)37%甲醛

6、實驗室常用的染色方法有哪幾種？

實驗室常用的染色方法有如下幾種：

（1）瑞氏染色法

染色結果使組織細胞的胞漿和核染成不同顏色，菌體呈藍紫色，易於識別。

（2）革蘭氏染色法

可用於鑒別革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌。革蘭氏陽性菌不易被酒精脫色而染成藍紫色，革蘭氏陰性菌則易被酒精脫色，經復染呈紅色。

（3）美藍染色法

多色性美藍染色液可染細菌莢膜，使其呈淺紅色（菌體為藍色）。

（4）姬姆薩染色法

適用於螺旋體、支原體、立克次氏體等病原體的染色。其可使組織細胞的胞漿和核染成不同顏色，而菌體呈藍紫色，易於識別。

7、給載玻片上的細胞染色的正確方法

取人口腔上皮細胞時必須漱口，除去雜質
用牙簽在口腔內壁刮幾下就下來了
將口腔上皮細胞浸到質量分數為0.9%的NACL溶液中，為了殺菌
染色方法是：在蓋玻片的一側滴一滴稀碘液
.
用吸水紙吸引,使染液浸潤標本的全部.
希望對您有幫助

8、骨髓片、血塗片主要依據瑞氏染色觀察細胞，為什麼還需要其他化學染色？比如鐵染色、過氧化物酶染色等。

骨髓片、血塗片主要依據瑞氏染色觀察細胞，為什麼還需要其他化學染色？比如鐵染色、過氧化物酶染色