1、骨髓間充質幹細胞分離的方法有幾種
目前常用的分離MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法，全骨髓法即根據幹細胞在低血清培養基中有貼壁優勢特性，定期換液除去不貼壁細胞，從而達到純化及擴增MSC的目的。密度梯度離心法即根據骨髓中各細胞成分比重的不同，分離單核細胞進行貼壁培養。二者本質上無多大區別。隨著對MSC表面抗原認識的深入，又有人利用免疫方法如流式細胞儀法、免疫磁珠法等對其進行分離純化。但經過流式或磁珠分選後的細胞出現了增殖緩慢等一些問題，加之成本較高和技術的難度，在某種程度上限制了這些方法的廣泛應用。
2、從血液中分離造血幹細胞的原理是什麼？
造血幹細胞儲存在骨髓血中，在百從外周血採集前，要注射集落刺激因子（就是動員劑度），使得骨髓血中造血問幹細胞釋放到外周血，大大增加外周血中造答血幹細胞濃度。達到一定濃度後，通過體外循回環，利用離心原理來分離和提取造血幹細胞。原理和採集答血小板相同
3、骨髓幹細胞的分離
骨髓抽取及骨髓幹細胞的分離純化：患者在無菌條件下從髂後上棘進行穿刺，分不同部位抽取骨髓l0～20 mL，置於肝素化的無菌離心管中，骨髓離心取出脂肪層
4、為什麼捐獻造血幹細胞時分離出幹細胞之後再把剩餘的血液成分輸回捐獻者體內
50-100MM?
我想你是搞混淆了
沒有50-100MM這個數字
在報名做采樣的時候,需要抽取5-10ML血液樣本進行HLA分型檢測.你是不是指這個?
這只是做分型實驗用的血液樣本,配型成功之後才會進行真正的捐獻
"需要處理1萬毫升血量"這個就是需要進行血液分離與回輸的原因了.就是說1萬毫升的血液經過循環才能提取出需要量的幹細胞.只提取患者需要的造血幹細胞,血液中的其他成分回輸到你的體內,還要維持你身體的正常運轉啊
5、捐獻骨髓時，為什麼把分離過的血液要輸回捐獻者體內呢？不輸回可以嗎？
採集外周血造血幹細胞時,每次採集循環的血量一般都在10000毫升以上,相當於一個版體重50公斤人身體兩權倍的血量.必須把血液回輸給捐獻者.要不然就不可能循環10000毫升的血.
血液循環的時候走的都是密閉的管路,血液不和血液分離機接觸,血液分離機只是提供一個動力.血液成分單採的耗材是非常安全的.
6、如何從小鼠骨髓中分離和培養DC
拉頸處死小鼠，無菌剝離股骨和脛骨，用Hank』S沖出骨髓細胞，PBS洗
滌1次，用0．83％Tris—NH4CL裂解紅細胞，RPMI1640培養液洗滌2次，調整細胞濃度為1×106個／mL，
並加入rmGM—CSF(1000 U／mL)和rmlL－4(500 U／mL)，接種於24孔培養板，置於37~C，5％CO2孵箱中
培養．第3天輕輕搖動培養板，吸走大部分懸浮細胞，加人等量的培養液，並補足細胞因子．隔日半量換液
1次，第7天收集懸浮或稍微貼壁的細胞．
7、骨髓單個核細胞分離，目的用於RNA的提取
用淋巴細胞分離液就可以了。天津生產的，90元一瓶，200毫升。
1 骨髓液3毫升，用3毫升PBS稀釋混勻；
2 平鋪於6毫升淋巴細胞分離液液面上，保持界面清晰；
3 2000轉/分水平離心30分鍾；
4 1毫升針頭吸取中間雲霧層；
5 用PBS洗滌兩次。
骨髓液用抗凝管收集就可以了，不要放到4度冰箱，避免溶血；淋巴細胞分離液使用前室溫平衡；離心機必須為水平離心，不要突然剎車，應使速度緩慢下降；骨髓液和淋巴細胞分離液必須保持界面清晰。