1、從血液中分離造血幹細胞的原理是什麼？
造血幹細胞儲存在骨髓血中，在百從外周血採集前，要注射集落刺激因子（就是動員劑度），使得骨髓血中造血問幹細胞釋放到外周血，大大增加外周血中造答血幹細胞濃度。達到一定濃度後，通過體外循回環，利用離心原理來分離和提取造血幹細胞。原理和採集答血小板相同
2、為什麼我percoll法分離骨髓，總是沒有細胞貼避
培養細胞有3種狀態：貼壁、半貼壁、懸浮。對於貼壁生長的細胞來說，如果培養過程中發現細胞懸浮，則說明細胞生長不好或者死亡。對於另兩類細胞來說，懸浮沒什麼不可以。 細胞貼壁生長時細胞生長的屬性，貼壁生長的細胞還會抑制其增殖和活性，所以人們還要通過用稀釋，分離，蛋白酶處理等方法使它們繼續生長繁殖
3、骨髓間充質幹細胞分離的方法有幾種
目前常用的分離MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法，全骨髓法即根據幹細胞在低血清培養基中有貼壁優勢特性，定期換液除去不貼壁細胞，從而達到純化及擴增MSC的目的。密度梯度離心法即根據骨髓中各細胞成分比重的不同，分離單核細胞進行貼壁培養。二者本質上無多大區別。隨著對MSC表面抗原認識的深入，又有人利用免疫方法如流式細胞儀法、免疫磁珠法等對其進行分離純化。但經過流式或磁珠分選後的細胞出現了增殖緩慢等一些問題，加之成本較高和技術的難度，在某種程度上限制了這些方法的廣泛應用。
4、骨髓單個核細胞分離，目的用於RNA的提取
用淋巴細胞分離液就可以了。天津生產的，90元一瓶，200毫升。
1 骨髓液3毫升，用3毫升PBS稀釋混勻；
2 平鋪於6毫升淋巴細胞分離液液面上，保持界面清晰；
3 2000轉/分水平離心30分鍾；
4 1毫升針頭吸取中間雲霧層；
5 用PBS洗滌兩次。
骨髓液用抗凝管收集就可以了，不要放到4度冰箱，避免溶血；淋巴細胞分離液使用前室溫平衡；離心機必須為水平離心，不要突然剎車，應使速度緩慢下降；骨髓液和淋巴細胞分離液必須保持界面清晰。
5、獻骨髓是怎麼抽取的
和目前常用的成分獻血方式基本一樣，一個手臂出血，一個手臂回血，血液在分離機中過一下，分離走造血幹細胞，採集時間一般需要1-2次每次3-4小時吧，這個要看患者的體重來決定採集量。整個過程會有身體麻木等不適，也不方便活動。採集完成就會恢復了。
6、骨髓移植是怎麼做的？？
（1）自體造血幹細胞移植將自體正常或疾病緩解期的造血幹細胞保存起來，在患者接受大劑量化療後回輸造血幹細胞。
（2）同基因造血幹細胞移植指同卵孿生之間的移植。
（3）異基因造血幹細胞移植同胞人類白細胞抗原（HLA）相合、親緣HLA不全相合或半相合、非親緣HLA相合、非親緣HLA不全相合等。
白血病患者和部分癌症患者是需要做骨髓移植的，白血病及其它癌症患者，做骨髓移植能夠提高患者的生存期，有的患者通過做骨髓移植還治癒了癌症。除了做骨髓移植，白血病等癌症患者為達到延長生存期或提高治癒率的目的，還需要考慮長期用中葯做抗血管治療，中葯有人參Rg3，在腫瘤發展中，它可抑制腫瘤新生血管生長，可誘導瘤體的凋亡。
7、如何從小鼠骨髓中分離和培養DC
1、 取骨髓，對倍稀釋
2、 用滴管沿管壁緩慢加入淋巴細胞分離液(45度角傾斜，盡量產生氣泡，起到緩沖作用)
3、 2000轉，離心30分鍾
4、 吸取白膜層，（沿管壁）交替多次吸取，加入5倍體積以上的PBS液
5、 1500轉，離心15分鍾（洗掉血小板）
6、 棄掉上清，留少許迴流液，輕彈管壁，加入PBS液至50ml
7、 800轉，離心10分鍾，（洗掉紅細胞）
8、 重復兩至三次
9、 加入PBS液至50ml，計數:？個細胞
離心後鋪板，1X1076孔板培養液，共鋪20板。無血清1640+DNA酶12h後輕晃培養液，洗板後加入完全培養基和GM—CSF(1000U/ml)和IL—4(500U/lml)
10、 第三天每孔補加等體積的完全培養基和GM—CSF(1000U/ml)和IL—4(500U/lml) ，這時細胞部分懸浮
11、 第五天為imDC，+1LPS(1ug/ml),誘導至第七天，為mDC。
8、骨髓幹細胞的分離
骨髓抽取及骨髓幹細胞的分離純化：患者在無菌條件下從髂後上棘進行穿刺，分不同部位抽取骨髓l0～20 mL，置於肝素化的無菌離心管中，骨髓離心取出脂肪層
9、捐獻骨髓時，為什麼把分離過的血液要輸回捐獻者體內呢？不輸回可以嗎？
採集外周血造血幹細胞時,每次採集循環的血量一般都在10000毫升以上,相當於一個版體重50公斤人身體兩權倍的血量.必須把血液回輸給捐獻者.要不然就不可能循環10000毫升的血.
血液循環的時候走的都是密閉的管路,血液不和血液分離機接觸,血液分離機只是提供一個動力.血液成分單採的耗材是非常安全的.