1、脾細胞和骨髓瘤細胞融合後,如何篩選雜交瘤細胞?其原理是什麼?
放在選zd擇性培養基上培養..雜交到的細胞有 3種 脾細胞和脾細胞, 脾細胞和瘤細胞, 瘤細胞和瘤細胞。3種 ..放在選擇性培養基上連續培養. 比如說有什麼脾細胞可以分泌出抗體那種抗原的物質...而其他細胞不能夠抵抗..脾細胞和脾細胞 一般不會培養到50代..就會死了回..放在選擇性培養基上的瘤細胞和瘤細胞 沒有相應的抗答體 所以自動被消滅掉..脾細胞和瘤細胞..因為具有無限繁殖和有抗體產生 所以能夠存活.存活下來的 就是合格的雜交瘤細胞.. 一般篩選2次...
2、為什麼有些雜交瘤細胞不能分泌抗體?雜交瘤細胞不是B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的雜種細胞么?
雜交瘤細胞既能大量增殖也能分泌抗體,這個說法是正確的,但前提是我們需要的是專一的抗體,在實際免疫過程中,由於採用連續注射抗原的方法,且一種抗原決定簇刺激機體形成相對應的一種效應B淋巴細胞,如果使用的免疫抗原有多個決定簇或純度不夠,從小鼠脾臟中取出的效應B淋巴細胞的特異性是不同的,當然融合以後的雜交瘤細胞分泌的抗體就不專一,這就需要必須從雜交瘤細胞群中篩選出能產生針對某一預定抗原決定簇的特異性雜交瘤細胞,還有就是篩選分泌專一抗體效率比較高的雜交瘤細胞。
3、骨髓瘤細胞和雜交瘤細胞一樣嗎?
骨髓瘤細胞盒雜交瘤細胞不一樣。
骨髓瘤細胞具有無限分裂能力,由於該細胞並非高度分化細胞,因此分裂能力較強,而其它腫瘤細胞分裂能力較弱,因此多在制備單克隆抗體時與B淋巴細胞融合,使單克隆抗體迅速大量增殖。
雜交瘤細胞是在制備單克隆抗體過程中,用骨髓瘤細胞和B細胞融合而成的細胞。
4、制備單克隆抗體時,為什麼要選用B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞?
制備單克隆抗體時,選用B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤的原因:
哺乳動物感染抗原後,其體內形成相應的B淋巴細胞,B淋巴細胞能分泌相應的抗體凝聚或殺死這些抗原。動物在免疫反應的過程中,每一種B淋巴細胞能分泌一種異性抗體,要想獲得大量的特異性抗體,必須使能分泌該單一抗體的B淋巴細答哦大量增至,B淋巴細胞具有產生單一抗體的能力,但不能在體外增殖;骨髓瘤細胞是一種癌細胞,它能在體外培養條件下無限增殖,但不能產生抗體。因此將二者融合,產生雜交瘤細胞,它會兼有兩個親本細胞的特性。
單克隆抗體技術的原理:
B淋巴細胞能夠產生抗體, 但在體外不能進行無限分裂; 而瘤細胞雖然可以在體外進行無限傳代, 但不能產生抗體。將這兩種細胞融合後得到的雜交瘤細胞具有兩種親本細胞的特性。免疫反應是人類對疾病具有抵抗力的重要因素。當動物體受抗原刺激後可產生抗體。抗體的特異性取決於抗原分子的決定簇,各種抗原分子具有很多抗原決定簇,因此,免疫動物所產生的抗體實為多種抗體的混合物。用這種傳統方法制備抗體效率低、產量有限,且動物抗體注入人體可產生嚴重的過敏反應。此外,要把這些不同的抗體分開也極困難。近年,單克隆抗體技術的出現,是免疫學領域的重大突破。
5、請教一下,在做雜交瘤融合時,脾細胞中的T細胞之類的會與骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤嗎?
雜交瘤細胞是漿細胞和骨髓瘤細胞融合,融合後的雜交瘤細胞才能即能產生抗體又能無限增殖。