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小鼠骨髓染色體手繪圖

發布時間:2020-08-29 07:56:18

1、小鼠骨髓細胞的染色體標本一般制備成什麼片

小鼠骨髓細胞的染色體標本一般制備成什麼片
首先要提前2小時向小鼠注射秋水仙素,處死小鼠,剪下四肢,剔除肉等,剪碎骨,加生理鹽水,離心取細胞(離心管底部),再經低滲處理,染色,滴冰片,鏡檢.很麻煩,具體的你可以去圖書館查閱相關資料(動物染色體制備).

2、求小鼠顯染色體顯微鏡下的照片

這是小鼠淋巴細胞染色體的。

3、如何提取小鼠骨髓細胞?

1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠),放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後,拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨,用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚,用眼科剪小心剪開皮膚,並分離兩下肢的皮膚,往下在腳踝處剪斷,往上在髖關節處剪斷,這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉,分別剪下Femurs(大腿骨)and Tibias(脛骨),剪去兩端軟骨,露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器,每支吸取1mlHBSS液,並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔,沖洗骨髓腔以獲得骨髓,一般用2-3ml培養基沖洗兩次,可沖出絕大部分細胞。
5、過濾:用2OO目的濾網過濾,將濾網的中央插入到離心管裡面25px處,然後用注射器吸取骨髓液,慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中,去除殘渣。
6、離心:將離心管放置離心機中離心10分鍾(1350r/min)
7、去上清,加入1ml紅細胞裂解液ACK,靜置3分鍾,再加9ml HBSS溶液,進行離心10分鍾,棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次,室溫,1350r/min離心10分鍾。計數活細胞,用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基,然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇,
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻,24孔板鋪板培養,每個孔1ml.

4、基因圖的小鼠H-2基因圖

MHC指某一物種的某一號染色體(如人HLA在第6號染色體,小鼠H-2在17號染色體)上一組密切連鎖的基因,它在主要組織相容性抗原識別以及清除外來和內在抗原起重要作用。人的MHC稱為HLA,在小鼠稱為H-2。其餘靈長類和某些非靈長類動物的MHC有了新的命名規定與建議,原MHC的後兩個字母HC改為小寫,即Mhc。
各種動物MHC的作用基本相似,包括:⑴MHC編碼的抗原廣泛分布於淋巴細胞和其它有核細胞的表面,與同種內移植排斥有關,也是刺激混合淋巴細胞反應(MLR)和移植物抗宿主反應(GVHR)的主要刺激抗原;⑵控制機體對抗原的免疫應答或免疫抑制, 以及免疫活性細胞之間相互作用;⑶編碼補體系統中的某些組分;⑷ MHC中某些抗原出現的頻率與對某些疾病的易感性有關。
小鼠的組織相容性抗原有幾十種以上,由常染色體H-1、H-2、H-3……、H-30等基因編碼(H表示組織相容性histocompatibility),此外,還受小鼠性染色體基因(雄性為XY,雌性為XX)控制。其中H-2抗原為小鼠主要組織相容性抗原系統,而其他抗原均系次要組織相容性抗原系統。MHC在小鼠即為H-2,對H-2系統研究得較為清楚,位於第17對染色體內, 長度約佔0.5分摩。H-2抗原具有高度多態性。用血清學方法檢出H-2Ⅰ類抗原特異性在100個以上,可分為私有抗原(private antigen)和公有抗原(public antigen)。私有抗原是某一近交系(inbred strain)小鼠特有的抗原標志,在某一特定近交系小鼠只能檢出一個K區和一個D區的私有抗原。公有抗原是在不同品系小鼠中都可檢出的一些交叉抗原, 每一品系小鼠通常都可檢出多個公有抗原特異性。根據血清學檢定抗原的反應格局,可將近交系小鼠分為不同單體型的品系,用H-2右上方小寫的英文字母表示,如H-2?x、H-2?d和H-2b等。
H-2基因群中可分為K、I、S和D四個區,I區又可分為I-A、I-E等亞區。按其編碼抗原結構和功能不同,又可將H-2復合體分為三類基因:⑴Ⅰ類基因,位於K區和D區,包括K、 D基因座,又增加了K2、L和L2(?)新的基因座;⑵Ⅱ類基因,位於I區,包括Aβ、Aα、Eβ和Eα等基因座;⑶Ⅲ類基因,包括補體C4、C2、Bf和編碼雄性激素結合蛋白性限蛋白 (sex limited protein, Slp)基因座(圖6-1)。由於小鼠H-2基因群含有Ⅰ(羅馬字)類基因,不同區中有I(英文大寫)區,應注意鑒別,切勿混淆。此外,H-2中有些基因位於Qa和TL區,可能參與H-2多態性的形成以及TCRγδ T細胞識別抗原時的遺傳限制。

5、制備小鼠骨髓染色體標本過程中有哪幾個主要步驟影響製片結果

在制備小鼠骨髓細胞染色體標本過程中以下幾個步驟需要注意:

提前3-4小時候注射秋水仙素,時間太長或者太短都會影響染色體中期的數目和形態。

在低滲過程中時間和吹打都很重要,低滲過度染色體膨脹,染色後肥肥的,低滲時間不過染色後染色體顏色很深看不出條帶。

滴片,如果是教學的實驗,要求玻片是冰的,而且要傾斜,滴的高度一般在25-30CM,滴完要過酒精燈,讓固定液蒸發。滴的數量不要太多否則會重疊.如果是醫院里的染色體製片有專門的滴片機。

小鼠骨髓細胞染色體標本製作:

原理:

由於小鼠四肢骨內骨髓細胞中的造血幹細胞是生成各種血細胞和原始細胞,具有高度的分裂能力,本實驗採用這一材料,通過前處理,低滲,固定,製片,染色等步驟製得染色體標本,可觀察到許多處於分裂中期的染色體,可以進行染色體組型分析;

試劑、試劑盒:秋水仙素、姬姆薩染液、固定液、低滲液、生理鹽水;

儀器、耗材:天平、離心機、恆溫培養箱、顯微鏡;

實驗步驟

一、材料和方法

1.  材料:小白鼠。

2.  設備:天平,離心機,恆溫培養箱,顯微鏡。

3.  葯品:秋水仙素,姬姆薩染液,固定液,低滲液,生理鹽水。

二、步驟

秋水仙素處理--取骨髓--低滲處理--固定--離心--再固定--再離心--滴片--染色--鏡檢--封片。

6、小白鼠骨髓細胞的染色體是端著絲粒染色體還是近端著絲粒染色體呢?

端著絲粒染色體。但是其他的。。。。。。這個實在不好說,因為很多動物的細胞里會同時存在多種染色體,所以一般不會這么問。

7、小白鼠骨髓細胞染色體為什麼和人類的染色體不一樣,為

主要是因為小白鼠骨髓細胞染色體都為近端著絲粒染色體!在顯微鏡的觀察下呈現U型或者V型!人類的染色體比較多樣,分為三種:①中央著絲粒染色體,著絲粒位於染色體縱軸的1/2~5/8處;②亞中著絲粒染色體著絲粒位於染色體縱軸的5/8~7/8處;③近端著絲粒染色體,著絲粒位於染色體縱軸的7/8至末端.這種U型的染色體人類也是有的!

8、小鼠骨髓細胞可以直接用於染色體的製作的原因

骨髓細胞有絲分裂旺盛,所以不需要體外培養就可以直接做實驗。外周血淋巴細胞幾乎都是處在G0或者G1期,一般情況下是不分裂的。在培養基中加入植物凝集素時,淋巴細胞受到刺激時轉化為淋巴母細胞,並開始進行有絲分裂。

9、小鼠骨髓細胞染色體標本制備和觀察實驗報告

首先要提前2小時向小鼠注射秋水仙素,處死小鼠,剪下四肢,剔除肉等,剪碎骨,加生理鹽水,離心取細胞(離心管底部),再經低滲處理,染色,滴冰片,鏡檢。很麻煩,具體的你可以去圖書館查閱相關資料(動物染色體制備)。

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