1、小鼠骨髓細胞低滲處理不夠或過度會出現什麼問題
你是搞血液病的研究生嗎 ?
2、小鼠骨髓細胞可以直接用於染色體的製作的原因
骨髓細胞有絲分裂旺盛,所以不需要體外培養就可以直接做實驗。外周血淋巴細胞幾乎都是處在G0或者G1期,一般情況下是不分裂的。在培養基中加入植物凝集素時,淋巴細胞受到刺激時轉化為淋巴母細胞,並開始進行有絲分裂。
3、怎樣取小鼠骨髓細胞
用豬肉刀
4、在制備小鼠骨髓細胞染色標本過程中有哪幾個主要步驟影響製片結果
在制備小鼠骨髓細胞染色體標本過程中以下幾個步驟需要注意:
提前3-4小時候注射秋水仙素,時間太長或者太短都會影響染色體中期的數目和形態。
在低滲過程中時間和吹打都很重要,低滲過度染色體膨脹,染色後肥肥的,低滲時間不過染色後染色體顏色很深看不出條帶。
滴片,如果是教學的實驗,要求玻片是冰的,而且要傾斜,滴的高度一般在25-30CM,滴完要過酒精燈,讓固定液蒸發。滴的數量不要太多否則會重疊.如果是醫院里的染色體製片有專門的滴片機。
小鼠骨髓細胞染色體標本製作:
原理:
由於小鼠四肢骨內骨髓細胞中的造血幹細胞是生成各種血細胞和原始細胞,具有高度的分裂能力,本實驗採用這一材料,通過前處理,低滲,固定,製片,染色等步驟製得染色體標本,可觀察到許多處於分裂中期的染色體,可以進行染色體組型分析;
試劑、試劑盒:秋水仙素、姬姆薩染液、固定液、低滲液、生理鹽水;
儀器、耗材:天平、離心機、恆溫培養箱、顯微鏡;
實驗步驟
一、材料和方法
1. 材料:小白鼠。
2. 設備:天平,離心機,恆溫培養箱,顯微鏡。
3. 葯品:秋水仙素,姬姆薩染液,固定液,低滲液,生理鹽水。
二、步驟
秋水仙素處理--取骨髓--低滲處理--固定--離心--再固定--再離心--滴片--染色--鏡檢--封片。
5、小鼠骨髓誘導巨噬細胞求助
單核細胞滲出血管,進入組織和器官後,可進一步分化發育成巨噬細胞,成為機體內吞噬能力最強的細胞。
巨噬細胞在不同組織中的名稱不同:在肺里稱「肺巨噬細胞」;在神經系統里稱為「小神經膠質細胞」;在骨里則稱為「破骨細胞」。
單核-巨噬細胞是對他們的統稱。
巨噬細胞(Macrophages)能夠吞沒、破壞受損傷組織,有助於啟動康復過程。雖然它們在損傷位點發揮關鍵作用,但一旦任務完成,就需要盡快撤離,結束炎症反應,為再生過程開路。繼續存在的巨噬細胞不利於組織恢復。盡管研究人員對於啟動巨噬細胞的分子機制研究的比較透徹,但關於其退出損傷位點的過程還了解甚少。研究人員鑒別出一清除外周神經損傷位點巨噬細胞的關鍵環節,對弄清脊髓損傷、中風和多發性硬化中相似的分子機制提供了重要線索。已知Nogo細胞受體家族與神經細胞生長有關,SamuelDavid等觀測Nogo家族成員NgR1的作用。NgR1類受體是位於細胞膜上的蛋白開關,受到特異化學信號或配體刺激後,誘導細胞反應。
6、小鼠骨髓中的細胞為什麼只能通過有絲分裂?
有絲分裂(mitosis)是指一種真核細胞分裂產生體細胞的過程,細胞的有絲分裂是一個連續動態的變化過程,但可以通過它的形態變化,特別是細胞核中的染色體行為,人為地劃分階段,並進行比較研究。在自然狀態下,一大群處於各個分裂期的細胞混雜在一起。必須仔細觀察,尋找有絲分裂過程各期典型形態特徵的細胞,從而建立起細胞周期的概念。
7、如何提取小鼠骨髓細胞?
1、頸椎脫臼法處死小鼠(C57型小鼠),放在75%酒精中侵泡3-5分鍾後,拎出後將小鼠鋪於超凈台上一個消毒托盤上。
2、無菌提取小鼠的四肢骨,用眼科鑷小心捏起小鼠兩髖關節之間的腹部皮膚,用眼科剪小心剪開皮膚,並分離兩下肢的皮膚,往下在腳踝處剪斷,往上在髖關節處剪斷,這樣可以游離出小鼠的兩條下肢。
3、小心剝離肌肉,分別剪下Femurs(大腿骨)and Tibias(脛骨),剪去兩端軟骨,露出紅色的骨髓腔。注意盡可能少的剪走骨髓腔。用紗布將骨頭上的肌肉用紗布擦拭乾凈。
4、拿一支1ml的無菌注射器,每支吸取1mlHBSS液,並用無菌的針頭套管將之輕輕擰彎。輕輕插入骨髓腔,沖洗骨髓腔以獲得骨髓,一般用2-3ml培養基沖洗兩次,可沖出絕大部分細胞。
5、過濾:用2OO目的濾網過濾,將濾網的中央插入到離心管裡面25px處,然後用注射器吸取骨髓液,慢慢將骨髓液經濾網注入離心管中,去除殘渣。
6、離心:將離心管放置離心機中離心10分鍾(1350r/min)
7、去上清,加入1ml紅細胞裂解液ACK,靜置3分鍾,再加9ml HBSS溶液,進行離心10分鍾,棄上清。
8、用HBSS液洗滌骨髓細胞2次,室溫,1350r/min離心10分鍾。計數活細胞,用培養基調整細胞濃度至1X106個細胞/ml.
9、在試管中加入RPMI-1640培養基,然後再加入20ng/ml的細胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巰基乙醇,
10、吸取培養基加入到沉澱中混勻,24孔板鋪板培養,每個孔1ml.
8、小鼠骨髓細胞的染色體標本一般制備成什麼片
小鼠骨髓細胞的染色體標本一般制備成什麼片
首先要提前2小時向小鼠注射秋水仙素,處死小鼠,剪下四肢,剔除肉等,剪碎骨,加生理鹽水,離心取細胞(離心管底部),再經低滲處理,染色,滴冰片,鏡檢.很麻煩,具體的你可以去圖書館查閱相關資料(動物染色體制備).
9、小鼠骨髓幼稚細胞和lymphocyte的區別
小鼠骨髓幼稚細胞和lymphocyte的區別
成年人的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。
紅骨髓能製造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能製造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。
黃骨髓主要是脂肪組織,當人體貧血時,它可以轉化為紅骨髓。有些葯物如氯黴素及呋喃類,在長期大量使用後,可影響骨髓造血功能,引起再生障礙性貧血.