1、由小鼠的B淋巴細胞(染色體數目40條)和小鼠骨髓瘤細胞(染色體數目60條)制備的雜交瘤(問題補充)
人家問的是常規下的染色體數,你硬是去分析有絲分裂後期,怎麼行呢。再者,細胞處於分裂期的時間很短,別說分裂後期了。
2、小鼠骨髓細胞染色體標本制備和觀察實驗報告
首先要提前2小時向小鼠注射秋水仙素,處死小鼠,剪下四肢,剔除肉等,剪碎骨,加生理鹽水,離心取細胞(離心管底部),再經低滲處理,染色,滴冰片,鏡檢。很麻煩,具體的你可以去圖書館查閱相關資料(動物染色體制備)。
3、制備小鼠骨髓染色體標本過程中有哪幾個主要步驟影響製片結果
在制備小鼠骨髓細胞染色體標本過程中以下幾個步驟需要注意:
提前3-4小時候注射秋水仙素,時間太長或者太短都會影響染色體中期的數目和形態。
在低滲過程中時間和吹打都很重要,低滲過度染色體膨脹,染色後肥肥的,低滲時間不過染色後染色體顏色很深看不出條帶。
滴片,如果是教學的實驗,要求玻片是冰的,而且要傾斜,滴的高度一般在25-30CM,滴完要過酒精燈,讓固定液蒸發。滴的數量不要太多否則會重疊.如果是醫院里的染色體製片有專門的滴片機。
小鼠骨髓細胞染色體標本製作:
原理:
由於小鼠四肢骨內骨髓細胞中的造血幹細胞是生成各種血細胞和原始細胞,具有高度的分裂能力,本實驗採用這一材料,通過前處理,低滲,固定,製片,染色等步驟製得染色體標本,可觀察到許多處於分裂中期的染色體,可以進行染色體組型分析;
試劑、試劑盒:秋水仙素、姬姆薩染液、固定液、低滲液、生理鹽水;
儀器、耗材:天平、離心機、恆溫培養箱、顯微鏡;
實驗步驟
一、材料和方法
1. 材料:小白鼠。
2. 設備:天平,離心機,恆溫培養箱,顯微鏡。
3. 葯品:秋水仙素,姬姆薩染液,固定液,低滲液,生理鹽水。
二、步驟
秋水仙素處理--取骨髓--低滲處理--固定--離心--再固定--再離心--滴片--染色--鏡檢--封片。
4、什麼樣的動物細胞可直接用於染色體標本制備
直接制備的話zd,就算是真皮層分裂旺盛的細胞,得到的分裂相也可能太少了,要制備比較多的染色體分裂相出來的話,可以對外周血液進行增內殖後制備起來多一點的,你可以取大鼠或者兔子靜脈血,肝素鈉抗凝,用細胞培養基(1640培養基混合小牛血清、抗生素、植物凝集素)37攝氏度進行48小時增殖。
當然要是您的條件不成熟的話,可以用小鼠的骨髓進行直接的染色體制備,容效果比真皮層細胞好的多。
5、小鼠骨髓細胞可以直接用於染色體的製作的原因
骨髓細胞有絲分裂旺盛,所以不需要體外培養就可以直接做實驗。外周血淋巴細胞幾乎都是處在G0或者G1期,一般情況下是不分裂的。在培養基中加入植物凝集素時,淋巴細胞受到刺激時轉化為淋巴母細胞,並開始進行有絲分裂。
6、動物染色體標本制備的原理及主要步驟
1)動物的選擇,一般用小鼠,其繁殖能力強,易於飼養.我們常用的是它們的骨髓細胞和精巢,因其分裂指數較高,不用體外培養就可以得到分裂中期的細胞.
2)秋水仙素用量要注意,太多或處理時間過長,會導致染色體的過分凝縮或著絲點裂解,最終會引起染色體形態不正常,甚至被破壞或溶解。
3) 低滲處理很關鍵。低滲液的量、處理時間均與細胞的數量有關。低滲過度,細胞會破裂;低滲不足則染色體在一起,分散不開。
4) 離心速度或離心時間也能影響染色體標本的制備。離心速度過大或離心時間過長,則會引起細胞破裂;反之,離心速度過小或離心時間過短,則細胞沉降不下來,則會引起大量細胞的丟失。
5) 固定液要隨用隨配,固定徹底後再打散細胞團塊,否則細胞容易破碎,染色體分散亦受到影響。
6) 載玻片要預冷.冷卻不夠,則會影響染色體的附著和鋪展。
7) 用吸管吹散細胞時用力必須盡量輕柔,用力過大則會造成細胞破裂,而染色體也會彌散在溶液中,在隨後的離心中將會丟失。
8) 滴片時的高度很重要,高度過低細胞不會破裂;過高則染色體過於分散甚至丟失,無法辨別出染色體的准確數量。
7、小鼠體細胞含40條染色體,用小鼠的B淋巴細胞與小鼠骨髓...
【答案】D
【答案解析】試題分析:由於小鼠體細胞含40條染色體,所以用小鼠的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合後,得到的雜交瘤細胞含80條染色體。又因為DNA是半保留復制,所以在被35P標記的培養液中培養,進入有絲分裂後期時,因著絲粒分裂,染色體加倍。因此其含有的被35P標記的染色體條數是160條。
考點:細胞融合、細胞分裂
點評:本題較簡單,要求學生識記細胞融合、細胞分裂的相關知識,了解細胞融合和細胞分裂過程中染色體的變化規律。